[发明专利]一种应用南极假丝酵母脂肪酶B生产替卡格雷手性药物中间体的方法

摘要

一种应用南极假丝酵母脂肪酶B生产替卡格雷手性药物中间体的方法，属于酶工程技术领域。将南极假丝酵母脂肪酶B（简称CALB）用于转化具有（a）所示结构式的外消旋替卡格雷中间体为单一构型中间体（b），其中R=CnH2n+1CO或CnH2n‑1CO(n=2～6)，R’=Cbz或Boc，R=CnH2n+1CO或CnH2n‑1CO(n=2～6)，R’=Cbz或BocR’=Cbz或Boc用CALB对所述的外消旋药物中间体进行拆分后得到产物（b）构型为（1S，4R）。本发明中，利用CALB对所述的底物进行拆分，催化效率高，得到的产物（b）纯度高。

主权项

一种将南极假丝酵母脂肪酶B(简称CALB)用于拆分具有(a)所示结构式的外消旋替卡格雷中间体，其中R＝CnH2n+1CO或CnH2n‑1CO(n＝2～6)，R’＝Cbz或Boc，获得单一构型中间体(b)；其特征在于，包括以下步骤：(1)生物催化剂选择：选用南极假丝酵母脂肪酶B为生物催化剂；(2)将南极假丝酵母脂肪酶B溶于通用缓冲液中，再与消旋体底物(a)混合，得到混合液；将所述的混合液在一定温度下进行转化，得到反应液；(3)样品萃取：向反应液中加入有机溶剂，进行振荡混合后，离心分离，得化合物(b)；所述的通用缓冲液为三羟甲基氨基甲烷(Tris)50mM；硼酸50mM；柠檬酸33mM；Na3PO450mM，用HCl或NaOH调pH3～12；转化温度为20～70℃；化合物(a)选自顺‑1‑丙酰氧基‑N‑苄氧羰基‑4‑氨基‑2‑环戊烯、顺‑1‑丁酰氧基‑N‑苄氧羰基‑4氨基‑2‑环戊烯，对应所得的化合物(b)为(1S,4R)N‑苄氧羰基‑4‑氨基‑2‑环戊烯‑1‑醇。