[发明专利]一种四重RT-PCR同时检测多种大蒜病毒的方法及其引物组合有效
| 申请号： | 201410092027.8 | 申请日： | 2014-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN103911461A | 公开（公告）日： | 2014-07-09 |
| 发明（设计）人： | 胡新喜;熊兴耀;雷艳;汪沛;何长征;宋勇;汤琳菲 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京知本村知识产权代理事务所 11039 | 代理人： | 刘江良 |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种四重RT-PCR同时检测多（10）种大蒜病毒的方法及其引物组合。具体采用四对引物，一次RT-PCR同时检测大蒜主要病毒洋葱黄矮病毒(OYDV),韭葱黄条病毒(LYSV)，葱潜隐病毒(SLV)以及青葱X病毒属病毒（Allexivirus，包括GarV-A、GarV-B、GarV-C、GarV-D、GarV-E、GarV-X和ShV-X）等多种大蒜病毒。因此，本发明一次检测的病毒种类增多，检测效率极大提高，检测的成本极大降低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 rt pcr 同时 检测 多种 大蒜 病毒 方法 及其 引物 组合 | ||
【主权项】：
一种四重RT‑PCR同时检测多种大蒜病毒的方法，其特征在于，其步骤包括：1）取大蒜叶片，提取其RNA；2）以步骤1）得到的RNA为模板，通过反转录，得到cDNA；3）以步骤2）得到的cDNA为模板，用四对引物对其进行PCR扩增；4）PCR产物凝胶电泳，根据目的片段大小及阳性对照，判断病毒感染情况；其中，所述引物如下：青葱X病毒属病毒的引物为：正向引物如SEQ ID NO.1所示；反向引物如SEQ ID NO.2所示；检测洋葱黄矮病毒的引物为：正向引物如SEQ ID NO.3所示；反向引物如SEQ ID NO.4所示；检测韭葱黄条病毒的引物为：正向引物如SEQ ID NO.5所示；反向引物如SEQ ID NO.6所示；检测大蒜潜隐病毒和葱潜隐病毒的引物为：正向引物如SEQ ID NO.7所示；反向引物如SEQ ID NO.8所示。
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