[发明专利]尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因的分析方法和应用无效
| 申请号： | 201410093631.2 | 申请日： | 2014-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN103911438A | 公开（公告）日： | 2014-07-09 |
| 发明（设计）人： | 眭维国;戴勇;谭秋培;薛雯 | 申请（专利权）人： | 眭维国;戴勇 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 何平 |
| 地址： | 518118 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因的分析方法，其通过使用hMeDIP-Chip技术得到尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因，深入研究这些差异表达基因将有助于进一步阐明尿毒症的发病机理，为尿毒症的诊断和治疗提供新途径。上述尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因的分析方法设计合理可行，能够有效地协助建立一种尿毒症差异表达基因的图谱模型，获取作为中间结果的尿毒症的相关信息。 | ||
| 搜索关键词： | 尿毒症 甲基化 状态 差异 表达 基因 分析 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：分别采集尿毒症患者和健康人的血液样本，并分别从所述血液样本中提取DNA；将所述DNA消化成200～1000bp的DNA片段，并加入76mer完全羟甲基化的寡核苷酸链作为阳性对照；将含有所述阳性对照的所述DNA片段加热变性，再将得到的单链DNA样本分成两份，其中一份作为实验组加入抗5’‑羟甲基化胞嘧啶核苷抗体得到DNA片段抗体复合物，另一份作为对照组，记为Input，其中，实验组用免疫磁珠法分离所述DNA片段抗体复合物，共沉淀后非羟甲基化的DNA片段被清洗除去，得到纯化的DNA片段抗体复合物，记为hMeDIP；对上述实验组纯化的DNA片段抗体复合物和对照组的DNA片段进行扩增；对扩增后的实验组DNA片段抗体复合物和对照组DNA片段分别使用Cy5和Cy3染料标记；将染料标记后的实验组DNA片段抗体复合物与对照组DNA片段混合后与羟甲基化微阵列检测芯片杂交，使用hMeDIP‑Chip技术对比分析尿毒症患者和健康人的芯片杂交结果，得到尿毒症羟甲基化状态的差异表达基因。
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