[发明专利]一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的超高效液相色谱测定方法

摘要

一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的超高效液相色谱测定方法，其特征在于：包括样品经简单前处理后直接引入超高效液相色谱仪进行测定，可快速、准确检测出尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的含量水平。本发明为全新的尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸含量的测定方法，采用外标法定量分析物；超高效液相色谱法更好的提高了方法的选择性与准确性。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化，很好的提高了色谱分离过程，极大程度上缩短了色谱分离分析的时间。

主权项

一种尿液中苯乙醛酸和苯乙醇酸的超高效液相色谱（UPLC）测定方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：a、收集志愿者尿液；b、样品前处理：室温下解冻尿液样品，混合均匀后，经过0.22 μm的水相滤膜过滤，取1.0 mL的尿液，加入1.0 mL 6 mol/L的盐酸和4.0 mL由二氯甲烷：异丙醇按9:1配成的混合萃取溶液，以2000 r/min振荡提取3分钟，10000 r/min离心1分钟，取下层有机相1.0 mL，于40℃氮吹至干，加入0.2 mL0.01%混合酸水溶液复溶，取5 μL引入超高效液相色谱仪分离分析；c、标准工作液配制：用纯水配制不同浓度的苯乙醛酸和苯乙醇酸混合标准工作溶液；d、超高效液相色谱（UPLC）测定，吸取配制好的不同浓度的苯乙醛酸和苯乙醇酸混合标准工作溶液，注入超高效液相色谱系统，苯乙醛酸和苯乙醇酸的线性回归方程分别为y = 1.12×10⁵x+1.36×10⁴和y = 1.94×10⁴x－2.48×10³，其中y代表目标分析物的峰面积，x表示尿液中目标分析物的浓度，标准曲线的相关系数均大于0.9990，对样品待测液进行测定，得到分析物的色谱峰面积，代入一元线性回归方程，求得样品待测液中分析物的含量。