[发明专利]细胞侵袭趋化模型及其制备方法

摘要

本发明公开了一种细胞侵袭趋化模型及其制备方法，包括以下步骤：（1）细胞培养；（2）下层基质胶配置；（3）maker1配置；（4）中间细胞层配置；（5）maker2配置；（6）上层基质胶配置。本发明所制备细胞侵袭趋化模型能够在克服重力的基础上直观得出细胞趋化和迁移的有力证据而且可以进行HE染色，做免疫组化以及免疫荧光，从而可以观察细胞相关蛋白表达情况。

主权项

一种细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）细胞培养：培养待研究的肿瘤细胞，吸取含有5x10⁵‑1x10⁶个所述肿瘤细胞的细胞悬浮液备用；（2）下层基质胶配置：将基质胶与肿瘤细胞培养基以体积比3:2‑1:1配置，混匀，加入胎牛血清，胎牛血清体积百分比浓度为8‑12%，得基质胶A；取60‑80ul所述基质胶A加入PCR薄壁管中作为下层基质胶，进行培养；（3）maker1配置：取maker，灭菌后加到如（2）所述的基质胶A内，得基质胶B；再吸取所述基质胶B均匀铺设一层在所述下层基质胶上，为maker1，进行培养；（4）中间细胞层配置：将步骤（1）中细胞悬浮液进行离心沉淀，弃掉上清液，将沉淀得到的肿瘤细胞加入50‑70ul所述基质胶A内混匀，得中间细胞层；将所述中间细胞层均匀铺设在所述maker1上，进行培养；（5）maker2配置：吸取步骤（3）中所述基质胶B，均匀铺设一层在所述中间细胞层上，为maker2，进行培养；（6）上层基质胶配置：在50‑70ul基质胶A中加入终浓度为3ng/8ul‑1ng/ul待研究的趋化因子或细胞，混匀后得上层基质胶；将所述上层基质胶均匀铺设在所述maker2上，置于培养箱中培养72小时至7天，即可。