[发明专利]一种快速检测中药综合毒性的生物测试方法

摘要

本发明公开了一种快速检测中药综合毒性的生物测试方法，包括如下步骤（1）制备测试用菌液取发光细菌冻干粉，用氯离子浓度为0.1‑1.0mol/L的溶液复苏，得测试用菌液；（2）检测取待检中药样品，用测试用菌液检测，确定发光强度抑制率为50%的样品浓度以及浓度‑效应动力曲线。本发明方法检测准确度和灵敏度均较高，操作简单。

主权项

一种快速检测中药综合毒性的生物测试方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）制备测试用菌液：取发光细菌冻干粉，用氯离子浓度为0.1‑1.0 mol/L的溶液复苏，得测试用菌液；（2）检测：取待检中药样品，用测试用菌液检测，确定浓度‑效应动力曲线以及发光强度抑制率为50%的浓度；所述待检中药为生雷公藤、生苍耳子、吴茱萸、蛇床子、醋甘遂、醋商陆、贯众、马钱子、天南星、重楼；步骤（2）所述检测的方法如下：a、预测试：取待检中药样品，用水稀释成5个浓度的待检液，体积百分比分别是：100%、25%、6.25%、1.5625%、0.39%，以氯离子浓度为0.51 mol/L的溶液为标准液，在所述待检液和标准液中加入测试用菌液，菌液加入量为待检液或标准液体积的1/25~1/15，放置5~30min，检测发光强度，计算5个浓度的发光强度抑制率；b、确定检测浓度的上限及下限：根据步骤a的结果，以抑制率为90～100%的任一浓度为上限，若样品原液的抑制率未达到90%，则以样品原液为上限；以抑制率为0～10%的任一浓度为下限；c、测试：在步骤b确定的浓度上限和下限之间增配6~9个浓度的待检液，以氯离子浓度为0.51mol/L的溶液为标准液，在所述待检液和标准液中加入测试用菌液，菌液加入量为待检液或标准液体积的1/25~1/15，放置5~30min，检测发光强度，制作浓度‑效应动力曲线，计算抑制率为50%的浓度；步骤a和步骤c中，所述待检液中加有含氯离子的溶液，氯离子的浓度为0.1‑1.0 mol/L。