[发明专利]基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌在审
申请号: | 201410118148.5 | 申请日: | 2014-03-27 |
公开(公告)号: | CN103911338A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 刘文洪;叶志青;王炜钢;李俊峰;张贝贝;贾孟荻 | 申请(专利权)人: | 浙江中医药大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 王桂名 |
地址: | 310053 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌。本发明依据原核密码子使用频率表,人工合成不同偏好全基因序列和人源原基因序列,并克隆在不同表达载体上,然后转化到不同表达大肠杆菌菌株中,共构建27株工程菌。PCR筛选阳性克隆、IPTG诱导表达、SDS-Page电泳和HPLC检测,筛选获得了一株经偏好性改造能高效表达融合蛋白的工程菌株,该工程菌株命名为RPP②,经液相检测RPP②目的蛋白的表达量是所构建的未经改造人源原基因工程菌最高表达量的2.4倍,若该菌用于工业化生产,能极大提高工业产值并为企业带来显著经济效益。 | ||
搜索关键词: | 基于 密码子 偏好 构建 表达 igf 基因 工程 | ||
【主权项】:
一种基于原核密码子偏好性构建高表达IGF‑1基因的工程菌,其特征在于:所述工程菌为能在胞内表达或分泌表达重组人胰岛素样生长因子融合蛋白的基因工程菌,所述工程菌为大肠杆菌工程菌,所述融合蛋白的氨基酸序列为Seq ID No:4所示。
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