[发明专利]一种荧光微球免疫层析试纸条的制备及定量检测方法

摘要

本发明公开了一种荧光微球免疫层析试纸条的制备方法及定量检测方法。本发明以无皂乳液聚合法制备的发光纳米粒子为标记，采用免疫层析技术，制备荧光微球免疫层析试纸条，然后制成构成包括样本垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水纸的检测卡，其中硝酸纤维素膜上固定有检测线和质控线。在检测过程中，采用荧光微球最佳激发光源进行激发，发射出的荧光经过滤光片后，用CCD扫描技术或光纤技术，将发射光谱收集、聚集和倍增后，转换成数值信号，再将测定的检测线荧光强度乘以校正系数，把校正后的荧光强度代入预先设置在荧光分析仪中的标准曲线，即可通过荧光分析仪自动计算获得样本中待测物的浓度。本发明灵敏度高、定量准确、操作方便。

主权项

一种荧光微球免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：(1)荧光微球垫的制备：称取0.009g过硫酸钾，0.004g NaHCO₃溶于7ml去离子水水中，将一定质量的荧光染料溶于2ml无水乙醇及1ml苯乙烯后，加入到水溶液中，摇匀，通氮气5min，放入70℃恒温水浴震摇24h后，取出，离心(10000rpm×10min)分离出的聚合物分别用乙醇、去离子水离心洗涤3次，即得到聚苯乙烯荧光微球。用制备的荧光微球来标记抗体、抗原或其它特异性结合物质，并将其喷涂在玻璃纤维膜上。(2)硝酸纤维素膜的制备：将抗体、抗原或其它特异性结合物质包被到硝酸纤维素膜上制成检测区，将另一种抗体或抗原包被到硝酸纤维素膜上制成质控区。(3)组装和剪切：在粘性底板上依次搭接地粘贴滤纸、样本垫、荧光微球垫、硝酸纤维素膜以及吸水纸，并剪切成适当宽度即成为免疫层析试纸条。