[发明专利]一种含有两个以上催化基团的谷胱甘肽过氧化物酶GPX1突变体及其制备方法有效
申请号: | 201410138374.X | 申请日: | 2013-07-18 |
公开(公告)号: | CN103898074A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 魏景艳;郭笑;宋健 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08;C12N15/70 |
代理公司: | 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 | 代理人: | 张景林;王恩远 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 一种含有两个以上催化基团的谷胱甘肽过氧化物酶GPX1突变体及其制备方法,属于生物技术领域。先用基因突变或合成法获得突变体基因,再通过营养缺陷型原核表达系统或营养缺陷型和SPP低温联合表达系统,将两个或多个GPX的催化基团SeCys引入到突变体的底物结合部位,结果赋予其高的GPX活性;或者先将靶基因连同SeCys插入序列组装到分泌型哺乳类细胞表达载体上,再将SeCys插入序列结合蛋白2组装到胞内型哺乳类细胞表达载体上,将两种载体共转染同一哺乳细胞株,在亚硒酸钠存在下用哺乳细胞合成GPX。本发明方法简单,突变体活力和产量高、稳定性好,避免包涵体复性造成的产率下降和失活,从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 含有 两个 以上 催化 基团 谷胱甘肽 过氧化物 gpx1 突变体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种含有两个以上催化基团的谷胱甘肽过氧化物酶GPX1突变体,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。
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