[发明专利]用于适配子筛选的DNA双链分离方法以及适配子筛选方法和新的适配子在审
| 申请号： | 201410142420.3 | 申请日： | 2014-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN104974998A | 公开（公告）日： | 2015-10-14 |
| 发明（设计）人： | 梁超;李德芳;何小鹃;吕诚;姜淼;牛旭艳;刘彪;郭保生;刘进;何冰;党蕾;张戈;吕爱平 | 申请（专利权）人： | 中国中医科学院中医临床基础医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/115;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京市隆安律师事务所 11323 | 代理人： | 刘东方 |
| 地址： | 100700 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物领域，公开了一种用于适配子筛选的DNA双链分离方法以及适配子筛选方法和新的适配子；所述分离方法包括：1)取FITC-ssDNA亚文库溶液用酸进行中和；2)进行高分辨率琼脂糖电泳；3)分离ssDNA亚文库及其中的污染序列，切取ssDNA亚文库的目标条带，通过小分子量DNA纯化回收试剂盒进行回收，即得；所述适配子筛选方法还包括：1-1)准备随机ssDNA文库及引物；1-2)孵育筛选；1-3)扩增；1-4)取dsDNA与固定有链亲合素的磁珠进行孵育，然后加入碱性溶液即得；本发明新的适配子具有如SEQ ID NO.1或SEQNO.2所示的核苷酸序列。本发明提高了DNA双链分离效率，降低链亲合素及Biotin-ssDNA对ssDNA亚文库的污染，改善了筛选孵育过程中的细胞生存状态，提高cell-SELEX的成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 配子 筛选 dna 分离 方法 以及 | ||
【主权项】：
一种用于核酸适配子筛选中DNA双链的分离方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1)取由生物素‑链亲合素‑磁珠法及碱变性法获得的FITC‑ssDNA亚文库溶液用酸进行中和；2)将步骤1)所得中和后溶液进行高分辨率琼脂糖电泳；3)分离ssDNA亚文库及其中的污染序列，切取ssDNA亚文库的目标条带，通过小分子量DNA纯化回收试剂盒进行回收，即得。
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