[发明专利]用于检测常见缺失型α-地中海贫血的试剂盒及其使用方法

摘要

本发明公开了一种用于检测常见缺失型α-地中海贫血的试剂盒及其使用方法。所述试剂盒包括一对可以同时扩增α-珠蛋白基因簇中α1区段的特征序列A1和α2区段的特征序列A2的引物，一对扩增α-珠蛋白基因簇中--^SEA基因型的引物，一对扩增α-珠蛋白基因簇中--^THAI基因型的引物；一条特异性检测α1区段的特征序列A1的荧光探针，一条特异性检测α2区段的特征序列A2的荧光探针，一条特异性检测--^SEA基因型扩增产物的荧光探针，以及一条特异性检测--^THAI基因型扩增产物的荧光探针。本发明所述试剂盒对α-地中海贫血珠蛋白基因缺失检测具有高度的灵敏性、稳定性、准确性及较高的特异性。

主权项

用于检测常见缺失型α‑地中海贫血的试剂盒，包括扩增引物和荧光探针，其特征在于：所述的扩增引物为：一对可以同时扩增α‑珠蛋白基因簇中α1区段的特征序列A1和α2区段的特征序列A2的引物A1A2‑F和A1A2‑R，一对扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑^SEA基因型的Gap‑PCR引物SEA‑F和SEA‑R，以及一对扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑^THAI基因型的Gap‑PCR引物THAI‑F和THAI‑R；所述的荧光探针为：一条特异性检测α1区段的特征序列A1的荧光探针A1‑Prob，一条特异性检测α2区段的特征序列A2的荧光探针A2‑Prob，一条特异性检测‑‑^SEA基因型扩增产物的荧光探针SEA‑Prob，以及一条特异性检测‑‑^THAI基因型扩增产物的荧光探针THAI‑Prob；其中：所述的可以同时扩增α‑珠蛋白基因簇中α1区段的特征序列A1和α2区段的特征序列A2的引物对中，A1A2‑F：5’‑GGGTTGCGGGAGGTGTAG‑3’；A1A2‑R：5’‑GCAGGCAGTGGCTTAGGA‑3’；所述的扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑^SEA基因型的Gap‑PCR引物对中，SEA‑F：5’‑CTCAGTATTGGAGGGAAGGA‑3’；SEA‑R：5’‑CAGTGTTGTAGTCATGGCTTA‑3’；所述的扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑^THAI基因型的Gap‑PCR引物对中，THAI‑F：5’‑AAGCGAGAGGAATCACATTC‑3’；THAI‑R：5’‑CTTGGATCTGCACCTCTG‑3’；所述的特异性检测特α1区段的征序列A1的荧光探针A1‑Prob为：A1‑Prob：5’6‑FAM‑CCTCGGCCCCACTGACCCTC‑3’BHQ‑1；所述的特异性检测α2区段的特征序列A2的荧光探针A2‑Prob为：A2‑Prob：5’ROX–CCTGGGCCGCACTGACCCTC‑3’BHQ‑2；所述的特异性检测‑‑^SEA基因型扩增产物的荧光探针SEA‑Prob为：SEA‑Prob：5’‑HEX‑TCCTCCTGCCCCAGCCTCCAA‑BHQ‑1‑3’；所述的的特异性检测‑‑^THAI基因型扩增产物的荧光探针THAI‑Prob为：THAI‑Prob：5’‑CY5‑TGTACCAAGTGGGCTGAGCCCTTGA‑BHQ‑2‑3’。