[发明专利]一种用于双表位展示的噬菌体载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种用于双表位展示的噬菌体载体及其构建方法。本发明所提供的用于双表位展示的噬菌体载体，为含有源自丝状噬菌体的用于展示外源肽的pⅢ蛋白和pⅧ蛋白的编码基因的环形载体。本发明首次将噬菌体pⅢ展示系统和pⅧ展示系统整合到一起，形成了噬菌体pⅢ和pⅧ双表位展示系统，可以在同一噬菌体的pⅢ蛋白和pⅧ蛋白上展示不同的外源多肽，从而丰富了噬菌体展示系统的种类，并为其生物学和医学应用提供了新的工具和方法。

主权项

1.用于双表位展示的噬菌体载体，为含有源自丝状噬菌体的用于展示外源肽1的pⅢ蛋白和用于展示外源肽2的pⅧ蛋白的编码基因的环形载体；所述pⅢ蛋白的编码基因源自噬菌体载体fUSE55；所述pⅧ蛋白的编码基因源自噬菌体载体f88-4；所述用于双表位展示的噬菌体载体，是按照包括如下步骤的方法制备获得的：(1)以噬菌体载体f88-4为模板，采用引物1和引物2进行PCR扩增，得到PCR产物；所述引物1为根据所述噬菌体载体f88-4上酶切位点MscI上游的序列设计的正向引物；所述引物2为根据所述菌体载体f88-4上酶切位点SacII下游的序列设计的反向引物；(2)用限制性内切酶MscI和SacII双酶切步骤(1)所得PCR产物，将酶切产物胶回收后与经过限制性内切酶MscI和SacII双酶切的噬菌体载体fUSE55的骨架片段相连，得到所述用于双表位展示的噬菌体载体。