[发明专利]黄鳝雌激素受体α基因、编码蛋白及酶联免疫检测方法有效
| 申请号： | 201410180865.0 | 申请日： | 2014-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN103965348A | 公开（公告）日： | 2014-08-06 |
| 发明（设计）人： | 丁炜东;邴旭文;曹丽萍;曹哲明 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C07K14/72 | 分类号： | C07K14/72;C12N15/12;C12N15/63;G01N33/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 邓唯;唐循文 |
| 地址： | 214081 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明采用RT-PCR方法获得黄鳝性腺中ERα序列，选择其抗原性较强的氨基酸序列相对应的cDNA序列作为模板克隆到长约945bp的序列，并将其克隆到pMAL-c2x表达载体中，通过IPTG诱导，Amylose-sepharose柱的纯化，获得了较纯的具有免疫活性的重组蛋白，采用FactorXa蛋白酶切、进一步纯化后，获得了可作为免疫原的ERα表达蛋白。免疫小鼠后，获得较高滴度的抗血清，并初步进行了免疫组化研究，表明该抗血清能特异与黄鳝性腺中的ERα蛋白结合，在卵母细胞膜上呈阳性反应，为进一步研究黄鳝性别发展中雌激素及其ERα等作用打下了基础。本发明还以此抗体为基础制备了ELISA检测试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 黄鳝 雌激素 受体 基因 编码 蛋白 免疫 检测 方法 | ||
【主权项】：
黄鳝雌激素受体α蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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