[发明专利]一种毛蚶多糖的鉴别方法

摘要

本发明涉及一种毛蚶多糖的鉴别方法，其特征在于使用凝胶色谱柱高效液相色谱法，提供一种毛蚶多糖的专属性鉴别方法，使毛蚶制剂在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。

主权项

一种毛蚶多糖的鉴别方法，其特征在于使用凝胶高效液相色谱法，具体步骤如下：色谱条件及系统适应性：用亲水球形高聚物为填充剂的凝胶色谱柱；以0.05‑0.15mol/L的硫酸钠溶液为流动相；示差折光检测器；柱温：30℃‑45℃；流速：0.5ml‑1 ml /min；理论板数按葡萄糖峰计算应不低于3000；制备毛蚶多糖：取毛蚶制剂研细，称取含毛蚶提取物约0.5‑5g的样品，加10‑20倍的石油醚：乙醇=1：0.5‑2的溶液，于30℃‑50℃水浴保温1‑3hr，超声提取15‑45min，脱脂棉过滤，取滤渣，挥干；加去离子水10‑30ml，用氢氧化钠溶液调pH至6.5～8.5，70℃‑90℃水浴0.5‑4hr，时时搅拌，过滤，滤液另器保存，滤渣加去离子水5‑50ml，继续水浴搅拌0.5‑2hr，时时搅拌，过滤，滤液合并，加1‑4倍量乙醇沉淀6hr以上，弃上清液，下层液离心，沉淀加去离子水5‑50ml ，70℃‑90℃水浴2hr，离心，取上清液；加1/4‑1/2体积的氯仿:正丁醇=4:1的溶液，剧烈振摇，离心，取上层液体，重复操作多次，至液面中间蛋白层完全消失，取上层液体，加入2‑5倍量乙醇沉淀6hr以上，弃上清液，下层液离心离心，取沉淀，80℃以下减压干燥，制得毛蚶多糖；制备毛蚶多糖供试品溶液：取毛蚶多糖，加流动相使溶解，制成每1ml含2‑25mg的溶液，即得；测定：取毛蚶多糖供试品溶液10‑100μl，注入液相色谱仪，测定；多糖图毛蚶谱中呈现2个特征峰，以图谱中的S峰为参照，计算2特征峰与S峰的相对保留时间：峰1为0.56±10%、峰2为0.68±10%、峰S 为1。