[发明专利]一种高效提高钝齿棒杆菌SYPA5-5 L-精氨酸生产能力的代谢改造方法无效
| 申请号： | 201410186926.4 | 申请日： | 2014-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN104059863A | 公开（公告）日： | 2014-09-24 |
| 发明（设计）人： | 许正宏;赵芹芹;罗玉常;窦文芳;张晓梅;耿燕;史劲松;饶志明 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/01;C12P13/10;C12R1/15 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种高效提高钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum)SYPA5-5L-精氨酸生产能力的代谢改造策略，属于生物技术领域。将SYPA5-5的N-乙酰谷氨酸激酶(N-acetylglutamatekinase,NAGK,argB)中268位的组氨酸突变为天冬酰胺，可有效解除L-精氨酸对NAGK的反馈抑制作用；将突变位点精确引入SYPA5-5基因组的相应位置，获得的抗反馈抑制菌株(H-7)L-精氨酸产量降低，中间代谢产物(L-鸟氨酸及L-瓜氨酸)大量积累。对H-7的arg基因簇进行转录分析，发现argGH转录水平降低。在H-7中对argGH加强表达，获得的重组菌株H-7-GH，L-精氨酸生产能力较SYPA5-5提高99.0%。对H-7-GH的发酵培养基进行初步优化，L-精氨酸产量达45.1g/L，较优化前提高了49.8%，较SYPA5-5提高了1.13倍。解除L-精氨酸对NAGK的反馈抑制，同时加强表达argGH基因的代谢改造策略，有效提高SYPA5-5的L-精氨酸生产能力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 提高 钝齿棒 杆菌 sypa5 精氨酸 生产能力 代谢 改造 方法 | ||
【主权项】：
一种高效提高钝齿棒杆菌SYPA5‑5 L‑精氨酸生产能力的代谢改造方法，其特征为：通过应用解除L‑精氨酸对钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5‑5合成途径限速酶—N‑乙酰谷氨酸激酶(N‑acetylglutamate kinase, NAGK, argB)的反馈抑制作用，同时加强表达argGH基因的代谢改造策略，有效提高其L‑精氨酸生产能力。
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