[发明专利]一种利用壳聚糖∕黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法及应用

摘要

一种利用壳聚糖/黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法及应用，通过使用壳聚糖和黄原胶作为包埋壁材，将双歧杆菌冻干菌粉接种于MRS肉汤中，在37℃培养条件下MRS活化三次，将所得菌泥制成菌悬液后与黄原胶溶液混合加入除氧剂，混匀后得到双歧杆菌菌胶液，将双歧杆菌菌胶液加入壳聚糖溶液中搅拌，获得微胶囊，待微胶囊完全交联后，过滤后洗涤，得到微胶囊的活菌数为3.0～4.1×10⁹CFU/g双歧杆菌微胶囊。壳聚糖和黄原胶都是天然的生物大分子，生物相容性好，无毒副作用。将制备出的双歧杆菌微胶囊加入自制酸奶中，贮存4周后，其活菌数仍大于10⁶CFU/g，饮用后可有效的发挥其益生作用。

主权项

一种利用壳聚糖∕黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将双歧杆菌冻干菌粉接种于MRS肉汤中，在37℃培养条件下MRS活化三次，前两次以3～5％的接种量转接，并在37℃的条件下培养22～24h，第三次按照2～3％的接种量转接，并在37℃的条件下培养18h，后进行离心处理并收集菌体，弃去上清液得菌泥，将菌泥与浓度为0.85～0.9％的无菌生理盐水混合配制成1.2～1.3×10⁹CFU/mL的菌悬液备用；2)取浓度为0.5～1.1％的黄原胶溶液，灭菌和离心除气处理后备用；3)取浓度为0.4～1.3％壳聚糖溶液，调节pH至5～5.9备用；4)取除氧剂溶液，除氧剂溶液中的除氧剂为异抗坏血酸钠或半胱氨酸盐酸盐，过滤除菌后备用；5)将步骤1)制备的菌悬液和步骤2)制备的黄原胶溶液按照1:(3～10)的质量比例混合得到菌胶液，后加入步骤4)制备的除氧剂，除氧剂的添加量按照菌胶液总量的0.03～0.07％加入，混匀后得到双歧杆菌菌胶液，将双歧杆菌菌胶液加入磁力搅拌器上的步骤3)制备的壳聚糖溶液中，菌胶液与壳聚糖比例为1:(3～6)，加入后搅拌，获得微胶囊；6)待微胶囊完全交联后，过滤后洗涤，得到微胶囊的活菌数为3.0～4.1×10⁹CFU/g双歧杆菌微胶囊。