[发明专利]一种利用黄原胶∕壳聚糖∕黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法及应用

摘要

一种利用黄原胶∕壳聚糖∕黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法及应用，通过将双歧杆菌冻干菌粉接种于MRS肉汤中，活化三次后收集菌体得菌泥，将菌泥与配制成菌悬液；将菌悬液和黄原胶溶液混合后加入除氧剂溶液，混匀后得到双歧杆菌菌胶液，将双歧杆菌菌胶液加入壳聚糖溶液中搅拌获得微胶囊；待微胶囊完全交联后过滤，与黄原胶溶液再次混合搅拌，后过滤洗涤，最终得到双层的双歧杆菌微胶囊，微胶囊的活菌数为3.0～4.5×10⁹CFU/g。将制备出的双歧杆菌微胶囊加入自制酸奶中，贮存4周后，其活菌数仍大于10⁶CFU/g，且酸奶的酸度和pH变化不大，从而对酸奶的品质不会造成影响，饮用后可有效的发挥其益生作用。

主权项

一种利用黄原胶∕壳聚糖∕黄原胶制备双歧杆菌微胶囊的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将双歧杆菌冻干菌粉接种于MRS肉汤中，在37℃培养条件下MRS活化三次，前两次以3～5％的接种量转接，并在37℃的条件下培养22～24h，第三次按照2～3％的接种量转接，并在37℃的条件下培养18h，后进行离心处理并收集菌体，弃去上清液得菌泥，将菌泥与浓度为0.85～0.9％的无菌生理盐水混合配制成1.2～1.3×10⁹CFU/mL的菌悬液备用；2)取浓度为0.5～1.1％和0.1％的黄原胶溶液，灭菌和离心除气处理后备用；3)取浓度为0.4～1.3％壳聚糖溶液，调节pH至5～5.9备用；4)配制除氧剂溶液，除氧剂为异抗坏血酸钠或半胱氨酸盐酸盐，过滤除菌以备使用；5)将步骤1)制备的菌悬液和步骤2)制备的浓度为0.5～1.1％的黄原胶溶液按照1:(3～10)的质量比例混合后加入步骤4)制得的除氧剂溶液中，充分混匀后得到双歧杆菌菌胶液，除氧剂的添加量按照菌胶液总量的0.03～0.07％加入，将双歧杆菌菌胶液加入磁力搅拌器上的步骤3)制备的壳聚糖溶液中搅拌，菌胶液与壳聚糖比例为1:(3～6)，加入后搅拌，获得微胶囊；6)待微胶囊完全交联后过滤，将过滤后的微胶囊与步骤2)制备的0.1％的黄原胶溶液以1g:(20～40mL)混合搅拌，后将微胶囊过滤，并洗涤，最终得到双层的双歧杆菌微胶囊，微胶囊的活菌数为3.0～4.5×10⁹CFU/g。