[发明专利]一种抗ROS氧化胁迫高效分泌表达外源蛋白的基因工程菌及其构建方法无效
| 申请号： | 201410208206.3 | 申请日： | 2014-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN103981111A | 公开（公告）日： | 2014-08-13 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;朱海峰;吴丹 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种能抗ROS氧化胁迫的高效分泌表达重组外源蛋白的基因工程菌及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过自克隆表达毕赤酵母(Picha pastoris)N-乙酰转移酶基因mpr1来降低诱导过程中细胞所受到的氧化胁迫。本发明以P.pastoris总DNA为模板经过PCR的方法获得N-乙酰转移酶基因mpr1，用pPICZ或者pPIC3.5系列构建mpr1表达载体，转化P.pastoris，从而实现了N-乙酰转移酶Mpr1在细胞内的过表达，以提升酵母抗氧化胁迫的能力。以胞外分泌表达来源于黑曲霉的α-葡萄糖苷酶P.pastoris对照菌为例，当在工业级发酵培养基中发酵培养时，胞内过表达mpr1基因的重组菌的ROS含量同对照相比降低了62％，细胞活性则提高了14％；同时，目的蛋白α-葡萄糖苷酶的降解也被抑制。本菌株对研究进一步提高P.pastoris重组表达异源蛋白的表达效率具有很好的利用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ros 氧化 胁迫 高效 分泌 表达 蛋白 基因工程 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种抗ROS氧化胁迫高效分泌表达外源蛋白的基因工程菌及其构建方法，所构建的菌株在抗ROS氧化胁迫能力上有明显提升。将外源基因导入该基因工程菌中，有利于菌株高效表达蛋白质。
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