[发明专利]一种7-去氢胆固醇的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种7-去氢胆固醇的分离纯化方法。首先将胆固醇生物合成所得7-去氢胆固醇发酵物质溶解于溶剂正己烷和水中，充分搅拌后进行过滤，过滤后静置分层，得到水相和有机相；对有机相蒸馏除去正己烷，然后加入甲醇加热搅拌，搅拌后抽滤，得到滤液和滤渣；对滤液降温结晶、抽滤，得到胆固醇；将滤渣中加入正己烷和甲醇的混合物加热搅拌，充分搅拌后进行减压蒸馏，蒸馏后所剩物质降温结晶、抽滤，最后得到高纯度产品7-去氢胆固醇。利用本发明能够有效从产物7-去氢胆固醇发酵物质中分离提纯出高纯度7-去氢胆固醇，并且还可以有效回收未转化的胆固醇，使其重新用于再次投料，从而使其原料得到更大程度的利用，符合目前经济可持续发展的需求。

主权项

一种7‑去氢胆固醇的分离纯化方法，其特征在于，所述分离纯化方法包括以下步骤：a、利用现有胆固醇生物转化合成方法得到的7‑去氢胆固醇发酵物质中含有酵母菌培养基、未转化的原料胆固醇和7‑去氢胆固醇；首先将所得7‑去氢胆固醇发酵物质溶解于溶剂正己烷中，并加入水，所述正己烷和水的加入量均为7‑去氢胆固醇发酵物质体积的5～10倍，加入正己烷和水后在常温下搅拌1～1.5h；搅拌后进行过滤，除去不溶于水和正己烷的杂质；所得滤液静置分层，然后进行分液，分出水相和有机相；分液后采用正己烷洗涤所得水相2～3次，合并有机相；b、将步骤a得到的有机相进行蒸馏，除去溶剂正己烷，得到的产物中加入48～52倍体积的甲醇，加热至64～66℃，在此条件下搅拌1.5～2小时，搅拌后进行抽滤，抽滤后得到滤液和滤渣； c、将步骤b得到的滤液降温至室温进行结晶，结晶后进行抽滤，得到胆固醇； d、将步骤b得到的滤渣加入正己烷和甲醇的混合物中，所述滤渣与正己烷和甲醇的混合物二者之间的体积比为1:10～12，所述正己烷和甲醇混合时二者之间的体积比1:1；然后升温至40℃～45℃，在此温度条件下搅拌1～1.5小时；搅拌后所得液体在真空度0.09MPa、10～15℃条件下进行蒸馏，蒸馏至原液体体积的30～35%；然后降温结晶，结晶后进行抽滤，最后得到高纯度产品7‑去氢胆固醇。