[发明专利]一种地加瑞克的固相合成方法

摘要

本发明公开了一种地加瑞克及原料的合成方法，以Fmoc‑氨基树脂为固相载体，用ivdde代替5位苯丙氨酸苯环4位氨基相连的乳清酸片段，从C端到N端依次缩合反应连接10个保护的氨基酸，得到全保护肽树脂，然后脱掉N端D‑Nal的Fmoc保护基，用乙酸酐和吡啶乙酰化，脱掉ivDde替换上Hor，用裂解试剂切割肽树脂，冰乙醚沉淀得到粗肽。此外，本专利还涉及到用ivDde‑OH和Fmoc‑Aph‑OH合成原料Fmoc‑Aph(ivDde)‑OH的方法。本发明先引入了ivDde合成十肽，之后再替换上Hor避免了重排副反应的发生，工艺步骤简单，易于控制，对人体和环境影响小，产率高，适合大规模生产。

主权项

一种地加瑞克的固相合成方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)将ivDde‑OH和Fmoc‑Aph‑OH溶于无水乙醇中，加入三氟乙酸，回流反应，合成Fmoc‑Aph(ivDde)‑OH；(2)采用Fmoc固相合成策略，利用偶联剂依次将Fmoc‑D‑Ala‑OH、Fmoc‑Pro‑OH、Fmoc‑ILys(Boc)‑OH、Fmoc‑Leu‑OH、Fmoc‑D‑4Aph(X)‑OH、步骤(1)制得的Fmoc‑4Aph(ivDde)‑OH、Fmoc‑Ser(tBu)‑OH、Fmoc‑D‑3Pal‑OH、Fmoc‑D‑Phe(4Cl)‑OH、Fmoc‑D‑2Nal‑OH按照地加瑞克氨基酸的序列连接至氨基树脂上，得到Fmoc‑十肽树脂，即Fmoc‑D‑2Nal‑D‑Phe(4Cl)‑D‑3Pal‑Ser(tBu)‑4Aph(ivDde)‑D‑4Aph(X)‑Leu‑ILys(Boc)‑Pro‑D‑Ala‑氨基树脂；(3)将步骤(2)得到的Fmoc‑十肽树脂脱除Fmoc保护基，然后乙酰化N端的氨基酸制备得到AC‑十肽树脂，即AC‑D‑2Nal‑D‑Phe(4Cl)‑D‑3Pal‑Ser(tBu)‑4Aph(ivDde)‑D‑4Aph(X)‑Leu‑ILys(Boc)‑Pro‑D‑Ala‑氨基树脂；(4)将步骤(3)得到的AC‑十肽树脂脱除ivDde保护基，然后用偶联剂将乳清酸连到C端第5位氨基酸上，切割肽树脂，得到地加瑞克粗肽；其中，X为tBuCbm保护基；步骤(4)中，将AC‑十肽树脂脱除ivDde保护基的方法是，用含有2％v/v的肼的DMF溶液脱除ivDde保护基，脱两次，每次30min，抽干溶液，DMF洗涤2～6次；步骤(4)中，切割肽树脂的方法是将三氟乙酸、苯甲硫醚、苯甲醚、1,2‑乙二硫醇按体积比90:5:3:2混合，将连接了乳清酸后的AC‑十肽树脂加入上述混合液，40℃震荡反应0.5～4小时后，将反应液过滤加入冷乙醚中，沉淀，离心后收集沉淀，得到地加瑞克粗肽。