[发明专利]一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备方法

摘要

本发明公开了大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备方法，按照以下步骤进行：将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中，28℃培养48h；以灭菌生理盐水将菌液浓度调至1×10⁸cfu/ml，置于70℃恒温水浴灭活3h，将灭活后的菌液置于高速离心机中，用3000r/min离心机离心35min，分离出上清液；向分离出的每10ml上清液中添加7500-8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀；使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后，用灭菌生理盐水清洗3次，调浓度至1×10⁸cfu/ml，制成福尔马林灭活的菌苗液，即为大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗；将稀释后的灭活菌苗液分装后，置于4℃冰箱中保存备用。本发明的有益效果是疫苗对大鲵烂腿病免疫率高。

主权项

一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：步骤1：将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中，28℃培养48h；步骤2：离心法集菌，以灭菌生理盐水将菌液浓度调至1×10⁸cfu/ml，置于70℃恒温水浴灭活3h，将灭活后的菌液置于高速离心机中，用3000r/min离心机离心35min，分离出上清液；步骤3：向分离出的每10ml上清液中添加7500‑8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀；步骤4：使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后，用灭菌生理盐水清洗3次，调浓度至1×10⁸cfu/ml，制成福尔马林灭活的菌苗液，即为大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗；步骤5：将稀释后的灭活菌苗液分装后，置于4℃冰箱中保存备用。