[发明专利]小麦背景中长穗偃麦草染色体特异标记及其应用

摘要

本发明涉及小麦背景中长穗偃麦草染色体特异标记及其应用。本发明根据植物EST序列信息设计引物，利用PCR技术从小麦-长穗偃麦草附加系中扩增得到长穗偃麦草的特异DNA片段并进行测序，依据与小麦无同源性的序列重新设计引物而获得长穗偃麦草染色体特异的分子标记。这些标记可用于长穗偃麦草向小麦转移染色体片段过程中的易位系鉴定，可用于抗赤霉病基因的连锁分析，可作为特异分子标记鉴定长穗偃麦草染色质而用于小麦抗赤霉病和抗逆性育种中。本发明克服了通过RAPD，AFLP，SSR等分子标记发展技术获得了部分染色体特异标记，但发展的长穗偃麦草染色体特异分子标记不但数量少，远远满足不了小麦抗性育种实际的需要，而且染色体特异性及稳定性还不理想的缺陷。

主权项

小麦背景中长穗偃麦草染色体特异标记，其特征在于步骤： (1)利用SDS酚‑氯仿法微量提取基因组DNA； (2)长穗偃麦草特异片段的PCR扩增； (3)长穗偃麦草特异扩增片段的回收； (4)氯化钙法制备感受态细胞； (5)菌落PCR； (6)长穗偃麦草染色体特异SCAR标记的建立； 所述引物根据长穗偃麦草的EST序列设计固定引物，根据SRAP引物设计随机引物，由固定引物和随机引物随机组合共56对引物，利用18条基础引物组合了56个引物组合后进行PCR扩增，选择出21个具有长穗偃麦草特异扩增的引物组合。