[发明专利]负载蛋白、多肽类药物微球立体形态及分布的测定方法

摘要

本发明公开了一种负载蛋白、多肽类药物微球立体形态及分布的测定方法，属于微球测定技术领域。该方法包括以下步骤：1)样品准备：将微球以固定液固定后，加入染色剂结合微球中的蛋白、多肽类药物；2)纳米计算机断层扫描：将待测微球样品置于Nano-CT断层扫描设备中，对微球进行扫描，获得微球的二维投影图像；3)数据分割：通过重建，得到微球不同截面的图像，以预设的灰度阈值，将微球分割为蛋白、多肽类药物部分和微球骨架部分；4)三维结构构建：以微球的截面图像进行三维重构，得到负载蛋白、多肽类药物微球的三维结构，并计算出微球的结构参数。采用该方法，能够得到微球内的三维立体结构。

主权项

一种负载蛋白、多肽类药物微球立体形态及分布的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)样品准备将微球置于容器中，加入固定液，静置，使固定液完全渗透微球；弃去固定液，以磷酸盐缓冲液清洗微球，弃去磷酸盐缓冲液；加入乙醇清洗，脱去微球中的水；然后加入含染色剂的乙醇溶液，静置，确保染色剂完全浸透微球，并与微球中负载的蛋白、多肽类药物结合，再以磷酸盐缓冲液将未与蛋白、多肽类药物结合的染色剂清洗去除，得到待测微球样品；2)Nano‑CT断层扫描将待测微球样品置于Nano‑CT断层扫描设备中，调节光子能量为5‑12keV，采用大视场模式扫描，设置单幅曝光时间为15‑25秒，并以0.2°‑0.8°的步长在‑90°‑+90°的角度内采集微球二维投影图像；3)数据分割对上述得到的微球二维投影图像进行重建，得到微球的不同截面图像，以预设的灰度阈值，将微球分割为蛋白、多肽类药物部分和微球骨架部分；4)三维结构构建以微球的截面图像进行三维重构，得到负载蛋白、多肽类药物微球的三维结构，并计算出微球的结构参数。