[发明专利]一种在钛表面构建层粘连蛋白/肝素/SDF-1α抗凝及诱导内皮化多功能层的方法有效
| 申请号： | 201410230833.7 | 申请日： | 2014-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN104028434A | 公开（公告）日： | 2014-09-10 |
| 发明（设计）人： | 陈俊英;刘涛;王健;陈圆;黄楠;刘阳;曾峥;魏来;王媛;刘诗卉;张琨;李敬安 | 申请（专利权）人： | 西南交通大学 |
| 主分类号： | B05D3/00 | 分类号： | B05D3/00;B05D5/00;B05D7/14;B05D7/24 |
| 代理公司： | 成都信博专利代理有限责任公司 51200 | 代理人： | 张澎 |
| 地址： | 610031 四川省成都市*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种在钛表面构建层粘连蛋白/肝素/SDF-1α抗凝及诱导内皮化多功能层的方法。首先利用PLL能够与碱活化的Ti表面发生静电结合作用的特性，构建氨基化的Ti表面。然后利用Ln和Hep之间的特异性结合作用，制备出Ln/Hep复合物，并通过EDC/NHS/MES偶联剂将Ln/Hep复合物共价固定于氨基化Ti表面。最后利用SDF-1α能够与Hep发生特异性结合的作用，将SDF-1α装载于Ln/Hep修饰的表面，从而构建具有抗凝/诱导内皮再生的生物功能性微环境。本发明在钛表面构建具有抗凝和诱导内皮再生能力的多功能层，显著改善了材料的血液相容性和损伤内皮修复能力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表面 构建 粘连 蛋白 肝素 sdf 抗凝 诱导 内皮 多功能 方法 | ||
【主权项】：
一种在钛表面构建层粘连蛋白/肝素/SDF‑1α抗凝及诱导内皮化多功能层的方法，其步骤包含： A、碱热活化：纯钛经表面抛光和清洗处理后，浸入浓度为1～5mol/L的NaOH溶液中，在60～90℃条件下反应8～16小时，单蒸水超声清洗后，浸入双蒸水中，60～90℃条件下反应8～12小时，单蒸水超声清洗后，37℃烘干； B、表面氨基化：将A步骤中碱热活化的样品浸泡于0.5～3mg/ml的多聚赖氨酸(PLL，MW150～300KDa)溶液中，在4℃条件下静置反应8～24小时，然后用磷酸盐缓冲液(PBS)清洗样品，保存待用； C、层粘连蛋白/肝素的共固定：首先将浓度为30～300μg/ml的层粘连蛋白溶液与浓度为3～10mg/ml的肝素钠溶液等体积共混，37℃条件下静置孵育1～3小时；配置摩尔比为2:1:1的EDC/NHS/MES(0.05mol)缓冲液，以1:10的体积比加入至层粘连蛋白/肝素的混合液中，室温下静置1～5分钟；然后将B步骤中涂覆有PLL的钛片浸泡于上述层粘连蛋白/肝素钠混合液中，37℃条件下静置反应3～6小时；最后用PBS漂洗样品，保存待用； D、SDF‑1α的装载：将C步骤获得的样品浸入50～500ng/ml的SDF‑1α溶液中，在4℃条件下静置反应8～24小时，PBS漂洗后即得目标物。
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