[发明专利]表达高效木聚糖酶重组质粒及重组毕赤酵母菌的构建方法无效
申请号: | 201410235606.3 | 申请日: | 2014-05-22 |
公开(公告)号: | CN104046649A | 公开(公告)日: | 2014-09-17 |
发明(设计)人: | 单安山;高赫 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150030 黑龙江省哈尔滨市*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明提供一种表达高效木聚糖酶重组质粒及重组毕赤酵母菌的构建方法。根据毕赤酵母密码子的偏好性,优化黑曲霉木聚糖酶基因XynB,连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,并在毕赤酵母GS115中实现了表达。重组酶GS115/pPICZαA-XynBopt的酶活提高1.8倍;用体外串联的方式构建木聚糖酶XynB-opt基因的双拷贝GS115/pPICZαA-(XynBopt)2,并在毕赤酵母GS115中实现了表达。双拷贝木聚糖酶的活性比单拷贝木聚糖酶的活性提高1.9倍。诱导10天后,双拷贝酶活达到15158.23±45.11U/mL。纯化后木聚糖酶酶活为6853.00±20.08U/mg。 | ||
搜索关键词: | 表达 高效 聚糖 重组 质粒 酵母菌 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种表达高效木聚糖酶重组质粒,其特征在于,序列如序列表Seq ID No.1所示。
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