[发明专利]蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法及该化合物的应用

摘要

本发明公开了蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法即该化合物的应用，包括提取浸膏、冷藏陈放后硅胶拌样、层析柱色谱分离、薄层色谱法分析和常压柱色谱分离提取各个化合物等步骤；通过该方法得到了两类5个来源于节肢动物蝼蛄中的生物碱类化合物，均是在节肢动物中首次报道发现的新化合物。该组分被测试有广谱的抗菌性能，可以作为广谱抗菌消毒剂或新的抗菌剂开发，本发明公开的新发现的来自于昆虫或节肢动物生物碱成分，将为该古老的传统药材提供一个新的用途。

主权项

蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、取蝼蛄原材料，干燥，粉碎，得到蝼蛄粉，备用；在温度为30‑50 ℃条件下，向蝼蛄粉中加入蝼蛄粉重量5‑20倍的二氯甲烷脱除虫蜡，经固液分离后，将得到的虫渣风干，再向干燥的虫渣中加入虫渣重量10‑20倍的质量浓度为70%的甲醇，在30‑50℃条件下，超声辅助提取和过滤，将滤液蒸发浓缩，得到浸膏状物，备用；步骤二、将步骤一得到的浸膏状物用质量浓度为70%的甲醇溶剂溶解，然后在‑4℃条件下冷陈12h，冷陈结束后除去不溶物，并将得到的清液在50℃温度下减压浓缩，得到的浓缩液加入硅胶进行拌样，搅拌均匀后置于通风处干燥，得到拌料样品，备用；步骤三、取步骤二得到的拌料样品以及拌料样品重量25‑30倍的硅胶，先将硅胶装入层析柱，再将拌料样品进行湿法上样，然后依次用体积比为9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的氯仿和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱，洗脱得到的馏分均采用TLC进行分析，合并相似馏分，共得到的馏分段1‑15，备用；步骤四、将步骤三得到的馏分段5运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1和7:3的氯仿‑甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为7:3的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，然后将有固体析出的馏分进行过滤，得到固体化合物，固体化合物进一步经环己烷‑丙酮重结晶后即得到白色固体粉末，即化合物Ⅱ；将步骤三得到的馏分段7运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3和1:1的氯仿‑甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为1：1的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体，将白色固体重结晶后得到白色固体粉末，即化合物Ⅲ；将步骤三得到的馏分段9运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿‑甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为3:7的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体和母液，将白色固体重结晶后得到白色固体粉末，即化合物Ⅳ；将母液放置28h，二次固体析出，经固液分离，得到白色粉末为化合物Ⅴ；将步骤三得到的馏分段11运用常压柱色谱进行分离，梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿‑甲醇溶液，收集馏分，并将馏分在室温下放置，经洗脱剂为3:7的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出，将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体，即化合物Ⅰ；所述的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的结构式分别为：化合物Ⅰ；化合物Ⅱ；化合物Ⅲ；化合物Ⅳ；化合物Ⅴ。