[发明专利]用于同时检测海洋中四种致病菌的多重PCR引物及其设计方法

摘要

本发明涉及一种用于同时检测海洋中四种致病菌的多重PCR引物及其设计方法，设计方法，设计方法包括利用引物设计软件设计同时检测阴沟肠杆菌、产单核细胞增生李斯特菌、嗜水气单胞菌和副溶血弧菌的多重PCR引物组合、筛选竞争状态优势引物利用PCR方法对竞争状态优势引物进行扩增验证，最后去除扩增引物中的竞争状态劣势引物，获得多重PCR引物组合，同时还公开了多重PCR的检测方法；与现有技术相比，本发明的优点在于：采用本发明建立的多重PCR同时检测阴沟肠杆菌、产单核细胞增生李斯特菌、嗜水气单胞菌和副溶血弧菌的方法，具有操作简便、快速，特异性强，灵敏度高等优点，只需一个PCR反应就可同时检测出这四种细菌。

主权项

一种用于同时检测海洋中四种致病菌的多重PCR引物，其特征在于：该四种致病菌的多重PCR引物分别包括阴沟肠杆菌、产单核细胞增生李斯特菌、嗜水气单胞菌和副溶血弧菌的多重PCR引物； 其中，阴沟肠杆菌的上下游引物为： P1：5’‑AAGCGHCCNGSNATGTAYATHGG‑3’； P2：5’‑CCNGCNGARTCNCCYTCNAC‑3’； 产单核细胞增生李斯特菌的上下游引物为： P3：5’‑TTCCGCAGAGGACAGTGATG‑3’； P4：5’‑CATATTCCACTTTAACCGTG‑3’； 嗜水气单胞菌的上下游引物为： P5：5’‑AAAGCGGATTATGCAGAAGCACTG‑3’； P6：5’‑GCTACTTTCTAGCATTTTCTCTGC‑3’； 副溶血弧菌的上下游引物为： P7：5’‑TGAGTTGCTGTTGTTGGATGC‑3’； P8：5’‑GTTGATGACACTGCCAGATGC‑3’。