[发明专利]单酶切载体的构建方法有效
申请号: | 201410246859.0 | 申请日: | 2014-06-05 |
公开(公告)号: | CN104059932A | 公开(公告)日: | 2014-09-24 |
发明(设计)人: | 刘国世;何长久;朱宽峰;孔瑾;汪锋;田秀芝;宋玉坤 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种单酶切载体的构建方法,包括如下步骤:1)单酶切位点的筛选;2)在目的基因两端引入酶切位点;3)对载体和目的基因进行酶切和电泳切胶回收;4)对目的基因和载体混合液进行温度梯度预处理;5)使用连接T载体用的solutionI连接载体与目的基因。本发明提供了一种单酶切载体构建的新方法,极大地提高了单酶切连接效率,同时极大地缩短了其连接时间。通过本发明方法,单酶切连接效率显著提高,连接时间只需90min左右,极大节约了人力、物力,降低了单酶切操作难度。 | ||
搜索关键词: | 单酶切 载体 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种单酶切载体的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:1)单酶切位点的筛选;2)在目的基因两端引入酶切位点;3)对载体和目的基因进行酶切和电泳切胶回收;4)对目的基因和载体混合液进行温度梯度预处理;5)使用连接T载体用的solution I连接载体与目的基因。
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