[发明专利]一种携带双自杀基因的可回复永生化肝细胞株及其构建方法有效
| 申请号： | 201410252305.1 | 申请日： | 2014-06-09 |
| 公开（公告）号： | CN104450620B | 公开（公告）日： | 2017-03-01 |
| 发明（设计）人： | 毕杨;何昀;何通川;唐霓;黄佳祎 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学附属儿童医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867 |
| 代理公司： | 重庆弘旭专利代理有限责任公司50209 | 代理人： | 文巍 |
| 地址： | 400014 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种可回复永生化肝细胞株的构建方法，从胚胎期12.5～14.5d天的小鼠肝脏中分离肝脏祖细胞，导入含有SV40T基因和HSV‑TK基因的逆转录病毒，筛选具有肝祖细胞标志及向成熟肝细胞分化功能的单克隆细胞株，再导入含有CD基因的逆转录病毒获得携带双自杀基因的可回复永生化小鼠肝祖细胞。该细胞株能够在体外不断增殖又具有正常的肝细胞表型及功能，通过位点重组和药物筛选等可控性方式实现了永生化细胞安全性的可调控，而且最大限度的保证了该细胞在体内应用的生物安全性，减少永生化肝细胞应用于体内的危险性，为生物人工肝技术提供一种可靠、安全、理想的肝细胞材料。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 携带 自杀 基因 回复 永生 肝细胞 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种可回复永生化肝细胞株的构建方法，从胚胎期12.5～14.5d天的小鼠肝脏中分离肝脏祖细胞，导入含有SV40T基因和HSV‑TK基因的逆转录病毒，筛选具有肝祖细胞标志及向成熟肝细胞分化功能的单克隆细胞株，再导入含有CD基因的逆转录病毒获得携带双自杀基因的可回复永生化小鼠肝祖细胞；所述含有SV40T基因和HSV‑TK基因的逆转录病毒结构如图1‑1所示，所述含有CD基因的逆转录病毒结构如图1‑2所示。
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