[发明专利]一种黑根霉胞外多糖在制备治疗或预防消化道肿瘤药物中的应用

摘要

本发明涉及一种黑根霉胞外多糖在制备治疗或预防消化道肿瘤药物中的应用，所述的黑根霉胞外多糖的制备方法如下：(1)取菌种保藏号为CGMCC NO.8436的黑根霉，经活化和发酵培养，制得发酵液；(2)将发酵液经分离纯化，制得粗提液；(3)将粗提液经树脂柱脱色，Seveage试剂振荡脱蛋白，Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱层析纯化，制得黑根霉胞外多糖。本发明利用黑根霉胞外多糖通过建立动物肿瘤模型，对黑根霉胞外多糖的实体抗消化道系统肿瘤活性进行探究，动物肿瘤实验抗肿瘤结果表明，黑根霉胞外多糖可以明显抑制胃癌肿瘤小鼠、结肠癌肿瘤小鼠的肿瘤块的生长，并且和现有化疗药物环磷酰胺联合用药抗肿瘤疗效明显高于环磷酰胺单独用药的抗肿瘤效果。

主权项

一种黑根霉胞外多糖在制备治疗或预防消化道肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的黑根霉胞外多糖的制备方法如下：(1)取菌种保藏号为CGMCC NO.8436的黑根霉接种于PDA培养基中，在25～30℃的条件下活化培养3～5d，制得活化后的菌丝；将活化后的菌丝转接于液体培养基中，在25～30℃、100～200rpm/min的条件下培养5～10d，制得发酵液；(2)将步骤(1)制得的发酵液经固液分离，收集分离后的液体，经浓缩后，在室温条件下，向浓缩液中加入3～4倍体积的体积百分比为95％的酒精，静置后，分离沉淀，将沉淀溶于蒸馏水中，再次分离沉淀，取上清液，制得粗提液；(3)将步骤(2)制得的粗提液经D301‑R型树脂柱脱色，收集洗脱液，然后加入洗脱液体积1/4的Seveage试剂振荡脱蛋白，取上清液，除去有机溶剂，制得粗糖溶液，然后将粗糖溶液经过Sephadex G‑50葡聚糖凝胶柱层析纯化，经蒸馏水洗脱，流度为5mL/min，检测合并收集高峰区的多糖洗脱液，将洗脱液进行浓缩、冷冻干燥，制得黑根霉胞外多糖。