[发明专利]一种推断人体死后间隔时间的方法

摘要

本发明公开了一种推断人体死后间隔时间的方法，属于医学检验领域。所述方法包括提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片；将涂片后的所述样本进行染色；对染色后的样本进行图像分析，分析的参数包括胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分光密度；将参数进行统计，获得参数的线性回归方程，根据线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。本发明提供的推断人体死后间隔时间的方法，在人体死后5～36h内，通过分析胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，得到异形指数、灰度参数和几何参数与PMI关系，从而推断人体死后间隔时间。

主权项

一种推断人体死后间隔时间的方法，其特征在于，所述方法包括：提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片，所述样本剪取自所述人死后5～36h的所述胆囊粘膜上皮细胞，所述涂片的方法为：在无菌手术条件下取出完整的胆囊，并置于含有400mg/L的庆大霉素的生理盐水中，在18℃恒温箱中存放0.5h，然后在保湿盒内，剪取0.5cm×0.5cm×1cm所述样本1份，首次剪取所述样本的时间在所述人死后5h完成，且每隔1h剪取一次，将剪取的所述样本浸于清水中洗涤，取出所述样本并用滤纸吸干，将吸干后的所述样本涂布，并按照均匀的直线涂布方式进行涂布；将涂片后的所述样本采用孚尔根染色方法进行染色，所述孚尔根染色方法包括：将备染的所述涂片浸入卡诺氏固定液中固定0.5h，取出后置于6N盐酸溶液中水解30min，取出后置于蒸馏水中洗涤，再浸入由副品红配制的席夫氏试剂中放置30min，用浓度为0.5％的偏重亚硫酸钠溶液浸洗2min，重复浸洗三次，流水冲洗5min后，用常规中性胶进行封片，每个胆囊组织在死后5～36h内的所有涂片，均来自同一个个体，须一次性集中完成染色，其中卡诺氏固定液的配制按照体积比为无水酒精：三氯甲烷：冰醋酸＝6:3:1；对染色后的所述样本采用彩色病理图像分析系统进行图像分析，所述采用彩色病理图像分析系统进行图像分析的方法为：在显微镜高倍物镜下摄取染色后的所述涂片的图像视野，以“弓”字型的形状作为采集线路，保证采集的图像无重复、无交叉，且每张所述涂片随机取10个视野，每个视野采集一幅图像，所述分析的参数包括：所述胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数，所述灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分光密度；将所述异形指数、平均光密度、平均灰度和积分光密度分别进行统计，获得所述异形指数、平均光密度、平均灰度和积分光密度的线性回归方程，所述线性回归方程为：YID＝11.333XID‑33.338，其中，YID为推断的死后间隔时间，XID为对应测量的异形指数；YAG＝0.679XAG‑54.277，其中，YAG为推断的死后间隔时间，XAG为对应测量的平均灰度；YAOD＝‑178.868XAOD+84.222，其中，YAOD为推断的死后间隔时间，XAOD对应测量的平均光密度；YIOD＝‑6.422XIOD+91.398，其中，YIOD为推断的死后间隔时间，XIOD为对应测量的积分光密度；根据所述线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。