[发明专利]一种牛乳β‑酪蛋白多元活性肽的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种牛乳β‑酪蛋白多元活性肽的制备方法及其应用，属于乳制品深加工技术领域。本发明所提供的方法是利用磷酸盐缓冲溶液分别配制糜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶溶液，然后分别依次用糜蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液和胃蛋白酶溶液对牛乳β‑酪蛋白进行酶解，利用超滤离心机分离酶解液获得上清液，将上清液经过纯化浓缩干燥后获得牛乳β‑酪蛋白多元活性肽。通过本发明方法制备的多元活性肽具有促进骨细胞增殖和增强免疫力功能，实现了一种方法制备多种活性肽，大大降低了生产成本，具有较好的应用价值。

主权项

一种牛乳β‑酪蛋白多元活性肽的制备方法，其特征在于，步骤如下：1)利用磷酸盐缓冲溶液分别配制糜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和牛乳β‑酪蛋白溶液，其中牛乳β‑酪蛋白溶液的浓度为1g/L；2)将步骤1)所得糜蛋白酶溶液和牛乳β‑酪蛋白溶液等体积混合调节pH后酶解处理，获得糜蛋白酶水解液；其中，糜蛋白酶的添加量为900‑1100U，酶解温度为37℃，酶解时间为20‑40min，pH6.5；3)调整步骤2)所得糜蛋白水解液的pH，再与步骤1)所得胰蛋白酶溶液进行等体积混合，酶解处理后获得胰蛋白酶水解液；其中，胰蛋白酶的添加量为9950‑10050U，酶解温度为37℃，酶解时间为1.5‑2.5h，pH7.0；4)调整步骤3)所得胰蛋白酶水解液的pH，再与步骤1)所得胃蛋白酶溶液进行等体积混合，酶解处理后获得酶解液；其中，胃蛋白酶的添加量为10150‑10350U，酶解温度为37℃，酶解时间为1.0‑2.0h，pH3.0；5)利用离心分离机分离步骤4)所得的酶解液，再利用凝胶层析色谱分离去除获得的上清液中小于700Da的杂质，得到多元活性肽溶液；6)将步骤5)所得的多元活性肽溶液真空浓缩后，冷冻干燥，获得牛乳β‑酪蛋白多元活性肽。