[发明专利]TaqMan实时荧光定量PCR检测杆菌样巴尔通体的方法

摘要

本发明提供一种TaqMan实时荧光定量PCR检测杆菌样巴尔通体的方法，选取杆菌样巴尔通体特异的一段基因序列，基于该特异基因序列，设计PCR引物与TaqMan探针，并建立了杆菌样巴尔通体的实时荧光探针定量PCR检测方法。该方法具有很好的特异性和稳定性，能够满足一般临床样品要求，不会出现假阳性反应。所设计的探针具有极高的敏感性，最低检测限可达到每个PCR反应检出3个拷贝的目的基因。本发明建立的实时荧光探针定量PCR方法可为杆菌样巴尔通体引起一系列疾病的早期临床诊断、疾病监测和筛查以及流行病学调查提供一种高效的实验室检测手段。

主权项

用于检测杆菌样巴尔通体的TaqMan实时荧光定量PCR引物及探针，其特征在于，所述引物包括：上游引物Bb2F：5′‑CAATTATCATCATTATTTGCTCCTGG‑3′下游引物Bb2R：5′‑TACTGCTGAGGTTGGGCGA‑3′所述探针为：探针BbT：5′‑F‑AGAAGACGATCCGTTACAT‑Q‑3′其中，F为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。