[发明专利]生产华根霉脂肪酶的黑曲霉基因工程菌及其制备方法在审
申请号: | 201410276599.1 | 申请日: | 2014-06-20 |
公开(公告)号: | CN105274124A | 公开(公告)日: | 2016-01-27 |
发明(设计)人: | 张谦;张田;唐克轩;贾佳;林智;郭宏涛;王剑英 | 申请(专利权)人: | 深圳市绿微康生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N15/80;C12N1/15;C12N9/20;C12R1/845;C12R1/685 |
代理公司: | 深圳市万商天勤知识产权事务所(普通合伙) 44279 | 代理人: | 王志明 |
地址: | 518000 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种华根霉脂肪酶表达盒、含有华根霉脂肪酶表达盒的表达载体、含有华根霉脂肪酶表达盒的黑曲霉基因工程菌及其制备方法,所述黑曲霉基因工程菌的制备方法为:获得华根霉脂肪酶的编码基因RCL、构巢曲霉色氨酸合成酶C的终止子TtrpC和扩展青霉甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的启动子Pgpdp,构建出RCL超表达盒Pgpdp-RCL-TtrpC,经T-DNA二元载体转化根癌农杆菌,再转化黑曲霉。本发明黑曲霉基因工程菌能高效地分泌食品级的华根霉脂肪酶,脂肪酶活力最高达到263IU/mL,在产酶条件下不会产生真菌毒素和抗生素,非常适合大规模生产食品级的华根霉脂肪酶。 | ||
搜索关键词: | 生产 华根霉 脂肪酶 曲霉 基因工程 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种华根霉脂肪酶表达盒,其特征在于,所述表达盒从5’至3’依次包含以下元件:(1)扩展青霉甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶基因的启动子Pgpdp;(2)华根霉脂肪酶基因RCL;(3)构巢曲霉色氨酸合成酶C基因的终止子TtrpC;所述Pgpdp的序列为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,所述RCL的编码序列为SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,所述TtrpC的序列为SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。
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