[发明专利]一种筛选抗原不同结合位点的单克隆抗体的方法有效
| 申请号： | 201410283271.2 | 申请日： | 2014-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN104020289A | 公开（公告）日： | 2014-09-03 |
| 发明（设计）人： | 赖增祖;叶欣;徐健;赖晓娟;杨奎东 | 申请（专利权）人： | 宁波艾科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/577 | 分类号： | G01N33/577;C07K16/28 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 张铂 |
| 地址： | 315211 浙江省宁波市镇海*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种筛选抗原不同结合位点的单克隆抗体的方法，将具有两个或两个以上抗原决定簇的抗原免疫动物，利用杂交瘤单克隆技术制备抗原特异性单克隆抗体，将阳性克隆细胞株进行体外细胞培养获得含有抗原特异性单克隆抗体的细胞培养上清液，以两两组合的方式将杂交瘤细胞培养上清液加入到共价交联有蛋白A或G的胶乳颗粒的溶液中，孵育后加入抗原，光吸收度增加的单克隆抗体组即为具有不同抗原结合位点的单克隆抗体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 抗原 不同 结合 单克隆抗体 方法 | ||
【主权项】：
一种筛选抗原不同结合位点的单克隆抗体的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将具有2个或2个以上抗原决定簇的抗原免疫小鼠，分离小鼠的脾脏细胞，并将小鼠脾脏细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合, 用ELISA方法筛选出阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株，并分别将各个阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株进行克隆化培养，再将每株单克隆抗体杂交瘤细胞分别培养，分别得到不同阳性单克隆抗体杂交瘤细胞的培养上清液；（2）将步骤（1）得到的不同阳性单克隆抗体杂交瘤细胞的培养上清液以两两组合的方式分别加入到共价交联有蛋白A或G的胶乳颗粒的溶液中，孵育后加入抗原, 测定600nM的吸光度，光吸收度没有改变的单克隆抗体组为一对具有相同抗原结合位点的单克隆抗体，光吸收度增加的单克隆抗体组为一对具有不同抗原结合位点的单克隆抗体。
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