[发明专利]超氧化歧化酶的提取方法

摘要

本发明公开了一种超氧化歧化酶的提取方法，属于生物酶制备技术领域。本发明先将原料用钴辐照；加入水蛭素，静置；倒去其上层血清，向下层红细胞中加入维生素E，进行离心；接着恒温水浴，水浴后立即冷冻，然后取出，静置，过滤；将得到的滤液加热，在搅拌情况下加入硫酸铜饱和溶液；再在搅拌情况下继续加入硫酸铝饱和溶液和亚硫酸钠饱和溶液；继续加热，并调节其pH值，然后加入硫酸铜饱和溶液，直至所述混合物的颜色变为无色；将得到的混合物自然冷却并静置，过滤，浓缩。本发明提供了一种超氧化歧化酶的提取方法，该方法采用的是物理法提取超氧化歧化酶，其制得的超氧化歧化酶纯度可达到80%以上。

主权项

一种超氧化歧化酶的提取方法，其特征在包括以下制作步骤：A、将新鲜的动物血液用钴辐照18分钟～20分钟；B、向经过步骤A处理的动物血液中加入占所述动物血液质量1%～3%的水蛭素，混合，静置2小时～3小时；C、在B步骤反应之后，倒去其上层血清，然后再向下层红细胞中加入占所述红细胞体积1倍～2倍的维生素E，以1200转/分钟～1500转/分钟离心30分钟～40分钟；D、将经过C步骤反应之后的混合物放入70℃～75℃的水中恒温水浴40分钟～60分钟，然后取出并立即放入冰中冷冻2分钟～3分钟，取出，静置2小时～3小时；E、在D步骤反应之后，过滤，将得到的滤液加热至50℃～60℃，然后在搅拌情况下加入占所述滤液质量1%～2%的硫酸铜饱和溶液，搅拌时间为1分钟～5分钟；F、在E步骤反应之后，继续在50℃～60℃和搅拌情况下加入占所述滤液质量1%～2%的硫酸铝饱和溶液和占所述滤液质量0.02%～0.04%的亚硫酸钠饱和溶液，搅拌时间为5分钟～10分钟；G、将经过F步骤反应之后的混合物加热至60℃～65℃，并调节其pH值至5.5～6.5，然后加入硫酸铜饱和溶液；当所述混合物的颜色变为无色时，停止就加入硫酸铜饱和溶液和停止加热；H、将经过G步骤反应之后的混合物自然冷却并静置1小时～1.5小时，过滤，浓缩。