[发明专利]一种柠檬酸杆菌溶藻基因的获取方法无效
| 申请号： | 201410293899.0 | 申请日： | 2014-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN104131002A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 孙朋飞;赵宇华;王冠;卢丽玲 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 邱启旺 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种柠檬酸杆菌溶藻基因的获取方法，通过Tail-PCR以及常规PCR技术克隆出了柠檬酸杆菌中的溶藻关键基因。本发明通过转座子以基因重组方式整合到细菌基因组上，从而制备出其突变株，进而使用Tail-PCR克隆出插入位点，克隆出上游基因，再根据上游基因与CitrobacterfreundiiCFNIH1基因组中glucose-1-phosphateadenylyltransferase基因设计一对引物，通过PCR扩增后得到溶藻基因下游基因，将上游基因和下游基因拼接，得到完整的柠檬酸杆菌溶藻基因。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 柠檬酸 杆菌 基因 获取 方法 | ||
【主权项】：
一种柠檬酸杆菌溶藻基因的获取方法，其特征在于，该方法具体为：以柠檬酸杆菌突变株基因组为模板进行tail‑PCR，扩增出柠檬酸杆菌中转座子插入位点，得到长度为559bp的上游基因，该上游基因序列如SEQ ID NO.5所示，进一步通过PCR扩增技术克隆出其完整下游基因，该下游基因序列如SEQ ID NO.20所示，将上游基因和下游基因拼接，得到完整的柠檬酸杆菌溶藻基因，该基因序列如SEQ ID NO.6所示。
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