[发明专利]一种小麦茎基腐病菌的分离方法

摘要

一种小麦茎基腐病菌的分离方法，先采集小麦植株，在通风阴凉条件下摊开放置1-2天后，从基部第一、二茎节处变褐色部分剪取1.8-2.2㎝茎段；用清水冲洗，然后用75%酒精消毒15s，再用无菌水漂洗；之后放入底铺有无菌滤纸的培养皿里，加入1-2mL无菌水，然后置于生化培养箱中，25℃、黑暗条件下培养，直至茎段上长出菌丝；挑取菌丝，种到添加乳酸的PSA培养基上，于25℃生化培养箱中黑暗培养；用接种针从菌落边缘挑取小块菌落，转至PSA斜面培养基上，置于生化培养箱中，25℃、黑暗条件下培养3天后，进行菌株保存，即分离出小麦茎基腐病菌。发明方法分离成功率高，处理后的茎秆可很快长出菌丝，转入PSA上后也能很快长出小麦茎基腐病菌的典型菌落，成功率达95%以上。

主权项

一种小麦茎基腐病菌的分离方法，其特征在于：其操作步骤为：步骤一、采集有白穗症状且茎秆基部第一、二茎节处的叶鞘或茎秆变褐色的小麦植株，备用；步骤二、将采集到的小麦植株在通风阴凉条件下摊开放置1‑2天；然后从放置后的小麦植株基部第一、二茎节处变褐色部分剪取1.8‑2.2㎝茎段；将所剪取的茎段用清水冲洗干净，然后用75%酒精消毒15s，再用无菌水漂洗2‑3次，备用；步骤三、将剪取的茎段放入皿底铺有无菌滤纸的培养皿里，向培养皿中加入1‑2mL无菌水，然后置于生化培养箱中，25℃、黑暗条件下培养1‑2天，直至茎段上长出菌丝，备用；步骤四、用接种针从每个茎段上挑取菌丝，分别接种到添加乳酸的PSA培养基上，然后置于25℃生化培养箱中黑暗培养2‑3天；所述乳酸的添加量为每200mLPSA培养基中加入1mL质量百分比为 25%的乳酸；步骤五、用接种针从菌落边缘挑取小块菌落，转至PSA斜面培养基上，置于生化培养箱中，25℃、黑暗条件下培养3天后，进行菌株保存，即分离出小麦茎基腐病菌。