[发明专利]利用可视化抗原芯片筛选单克隆抗体杂交瘤细胞的方法无效
申请号: | 201410310870.9 | 申请日: | 2014-07-01 |
公开(公告)号: | CN104062431A | 公开(公告)日: | 2014-09-24 |
发明(设计)人: | 刘箐;邱实 | 申请(专利权)人: | 上海理工大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N21/78 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 200093 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明一种利用可视化抗原芯片筛选单克隆抗体杂交瘤细胞的方法,将筛选单克隆抗体杂交瘤细胞所需的靶抗原或靶抗原类似物点样固定于基片上,将制备好的抗原芯片浸于封闭液中进行封闭处理,再将抗原芯片浸于单克隆抗体制备前期所获得的阳性杂交瘤细胞产生的细胞上清液中,再将抗原芯片浸于酶标二抗中,再将抗原芯片浸于显色液中,进行显色反应,如果在样点处有褐色、或者蓝黑色斑点显出,则判断该孔杂交瘤细胞与固定于此处的靶抗原或靶抗原类似物存在特异性的免疫反应;若在样点处没有斑点显出,则判断该孔杂交瘤细胞与固定于此处的抗原或抗原类似物不存在特异性的反应。本发明缩短了单克隆抗体杂交瘤细胞的筛选周期,降低了生产成本。 | ||
搜索关键词: | 利用 可视化 抗原 芯片 筛选 单克隆抗体 杂交瘤 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种利用可视化抗原芯片筛选单克隆抗体杂交瘤细胞的方法,其特征在于包括如下步骤:1)一个制备用于筛选单克隆抗体杂交瘤细胞的抗原芯片的步骤,在所述的制备抗原芯片的步骤中,将筛选单克隆抗体杂交瘤细胞所需的靶抗原或者靶抗原类似物按阵列方式点样固定于基片上,制成抗原芯片;2)将制备好的抗原芯片浸于芯片封闭液中进行封闭处理;3)将封闭处理后的抗原芯片浸于单克隆抗体制备前期所获得的阳性杂交瘤细胞产生的细胞上清液中,进行免疫杂交反应;4)将上述处理好的抗原芯片浸于过氧化物酶、或者碱性磷酸酶标二抗中,进行免疫杂交反应;5)将免疫杂交后的抗原芯片浸于二氨基联苯胺、或者联苯胺、或者氯化硝基四氮唑兰显色液中,进行显色反应;6)一个结果判定的步骤,在所述的结果判定的步骤中,如果在样点处有褐色、或者蓝黑色斑点显出,则判断该孔杂交瘤细胞与固定于此处的靶抗原或者靶抗原类似物存在特异性的免疫反应;若在样点处没有褐色、或者蓝黑色斑点显出,则判断该孔杂交瘤细胞与固定于此处的靶抗原或者靶抗原类似物不存在特异性的反应。
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