[发明专利]一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法有效
申请号: | 201410314040.3 | 申请日: | 2014-07-03 |
公开(公告)号: | CN104059142B | 公开(公告)日: | 2016-11-23 |
发明(设计)人: | 胥传来;王文彬;匡华;徐丽广;刘丽强;宋珊珊;吴晓玲 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K16/12;C07K16/06 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法,属于免疫分析技术领域。本发明利用突变型沙门氏菌脂多糖(Ra‑LPS)缺失了O特异性侧链的特点,采用EDC和NHS方法将LPS末端COOH与匙孔血蓝蛋白(KLH)进行偶联,免疫得到的小鼠血清对Ra‑LPS和完整型LPS均有效价。用不同血清组的沙门氏菌菌体包被检测小鼠血清均有交叉反应,证明该免疫原可以用来制备沙门氏菌交叉型血清或者单克隆抗体。该免疫原的合成方法为制备沙门氏菌交叉型单克隆抗体,从而实现在菌属水平上检测沙门氏菌奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 制备 沙门氏菌 交叉 抗体 免疫原 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法,其特征在于步骤为:取突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS 10mg,用1mL pH为4.6的0.01M 2‑吗啉代乙磺酸MES缓冲液溶解;称取0.48mg 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和0.29mg N‑羟基琥珀酰亚胺NHS,均用超纯水溶解后滴加到突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS反应溶液中,25℃反应8h;然后称取5mg 钥孔血蓝蛋白KLH并溶解于2倍于MES反应溶液体积的0.01M的碳酸盐缓冲液中,此时将活化后的突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS反应液滴加到KLH溶液中,室温反应过夜,即得沙门氏菌交叉型抗体的免疫原。
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