[发明专利]一种具有抗子宫内膜异位症的靶向基因纳米粒及制备

摘要

本发明提供一种具有高效抗子宫内膜异位症的基因纳米粒，该基因纳米粒负载了小分子干扰RNA基因药物，其纳米粒材料由壳寡糖、聚乙烯亚胺和透明质酸组成，其中壳寡糖与聚乙烯亚胺的比例为11，透明质酸占总纳米粒的比例为5‑30%，所使用的基因药物含磷摩尔数与纳米粒含氮摩尔数的比例为0.1‑16。本发明通过高分子纳米材料、利用受体‑配体特性，对靶标位于细胞内的基因药物的包封，可增加内异细胞对基因药物的摄取，增加靶标组织的转染效率，增加内异细胞对药物的摄取，有利于减小药物在正常组织或细胞的分布，降低药物的毒副作用，有利于提高该类基因药物的抗子宫内膜异位症疗效，可在制备抗子宫内膜异位症药物中的应用。

主权项

一种具有抗子宫内膜异位症的靶向基因纳米粒，该基因纳米粒负载了小分子干扰RNA基因药物，其纳米粒材料由重均分子量为17.5 KDa，脱乙酰度为95%的壳寡糖、分子量为800 Da的聚乙烯亚胺和分子量为60 KDa的透明质酸组成，其中壳寡糖与聚乙烯亚胺的比例为1:1，透明质酸占总纳米粒的比例为5‑30%，所使用的基因药物含磷摩尔数与纳米粒含氮摩尔数的比例为0.1‑16，所述的一种具有抗子宫内膜异位症的靶向基因纳米粒由如下的方法制备，其特征在于，所述方法通过以下步骤实现：（1）采用高碘酸法聚乙烯亚胺修饰CSO：称取壳寡糖 1.2g，高碘酸钠0.06g，分别溶于180mL和60mL PH 4.5的醋酸缓冲溶液中，反应前两溶液均氮气除去溶解氧，然后将高碘酸钠溶液滴加入壳寡糖溶液中，4℃冰浴下，400 rpm搅拌反应48h，反应结束后，加乙二醇终止反应，将终反应液置透析袋中透析8h，除去杂物，透析液待用，另称取聚乙烯亚胺溶于水中，缓慢加入到透析液中，搅拌反应48h，反应结束后，加硼氢化钠终止反应，然后透析48h，冻干，收集产物得壳寡糖‑聚乙烯亚胺共聚物；（2）取壳寡糖‑聚乙烯亚胺共聚物冻干品，加入去离子水分散，制备得到浓度为1mg/mL 的共聚物溶液；另取0.5mg/mL siRNA溶液，和上述共聚物溶液缓慢混合，室温静置30min，得到不同N/P比的壳寡糖‑聚乙烯亚胺/siRNA复合纳米粒，然后将该复合纳米粒与0.3 mg/mL的透明质酸溶液自组装30min，温度为30℃，得(壳寡糖‑聚乙烯亚胺/siRNA)HA复合纳米粒。