[发明专利]一种磷酸化肽的吸附富集方法、添加剂及其应用有效
| 申请号： | 201410324050.5 | 申请日： | 2014-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN104119422B | 公开（公告）日： | 2017-04-12 |
| 发明（设计）人： | 訾金;张朝良;林梁 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因研究院 |
| 主分类号： | C07K1/22 | 分类号： | C07K1/22;G01N1/40 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司44281 | 代理人： | 彭家恩,罗瑶 |
| 地址： | 518083 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种磷酸化肽的吸附富集方法。本申请的吸附富集方法包括(1)将非特异吸附抑制剂和部分待检样品添加到上样缓冲液，采用富集过滤柱进行磷酸化吸附富集；(2)收集富集产物，计算20种氨基酸在非磷酸化肽中丰度，作第一丰度，计算非磷酸肽所在蛋白质中20种氨基酸的丰度，作第二丰度，第一丰度比第二丰度，选比值较高的至少一种氨基酸为添加剂；(3)采用加入添加剂的上样缓冲液，对待检样品进行磷酸化肽吸附富集。本申请，运用氨基酸与多肽的竞争吸附作用，减小非磷酸化肽的吸附，增加磷酸化多肽富集的吸附选择性，为提高磷酸化检测的准确性和稳定性奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 磷酸化 吸附 富集 方法 添加剂 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种磷酸化肽的吸附富集方法，包括：(1)将非特异吸附抑制剂添加到上样缓冲液中，同时，将部分待检样品溶于上样缓冲液中，采用富集过滤柱对磷酸化肽进行吸附富集；(2)收集富集后的样品，对其进行分析，计算20种氨基酸在非磷酸化肽中丰度，作为第一丰度，并计算非磷酸肽所在蛋白质中20种氨基酸的丰度作为第二丰度，计算所述第一丰度比第二丰度的比值，选择比值较高的至少一种氨基酸作为添加剂；(3)将步骤(2)所述的添加剂加入到上样缓冲液中，使用加入了添加剂的上样缓冲液，再采用另外一个富集过滤柱对待检样品进行磷酸化肽富集。
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