[发明专利]一种在线快速检测样品总抗氧化性的方法

摘要

本发明属于检测分析技术领域，涉及一种利用高效液相色谱和自由基检测系统在线快速检测样品总抗氧化性的方法。所述高效液相色谱分析仪包括依次连接的进样器、四元梯度泵、色谱分析柱及柱温箱和光电二极管阵列 PAD检测器；所述自由基反应检测装置包括自由基反应模件、控温箱、高压泵和紫外可见光检测器，所述自由基反应模件与高效液相色谱仪相连接，所述控温箱控制自由基反应模件温度，高压泵与自由基反应模件连接，自由基反应模件与紫外可见光检测器相连接；所述色谱分析柱用C18反相色谱柱，型号为20×3.9mm，5um；所述的自由基为化学自由基；本发明方法测定过程中色谱图峰型完整、美观，无拖尾现象；测定结果准确、快速、选择性强而且灵敏度高。

主权项

一种在线快速检测柑橘样品总抗氧化性的方法，是利用HPLC‑FRSD分析系统检测样品总抗氧化性的分析方法，其特征在于，所述柑橘样品包括柑橘果皮和/或囊衣，和/或种子，和/或果汁，所述HPLC‑FRSD分析系统包括相互连接的高效液相色谱分析仪和自由基反应检测装置，所述高效液相色谱分析仪包括依次连接的进样器、四元梯度泵、色谱分析柱及柱温箱和光电二极管阵列PAD检测器；所述自由基反应检测装置包括自由基反应模件、控温箱、高压泵和紫外可见光检测器，所述自由基反应模件与高效液相色谱仪相连接，所述控温箱控制自由基反应模件温度，高压泵与自由基反应模件连接，自由基反应模件与紫外可见光检测器相连接；所述色谱分析柱用C18反相色谱柱，型号为20×3.9mm，5um；所述的自由基为化学自由基；所述化学自由基选择DPPH自由基或ABTS自由基；所述的在线快速检测样品总抗氧化性的方法包括如下进行的步骤：(1)样品以体积分数为80‑90％的甲醇，或者是其它具有相似极性的有机溶剂或所述有机溶剂的混合物作为溶媒，于40‑60℃超声波提取10‑50min，再震荡提取1‑15h，得提取液；(2)将步骤(1)所得的提取液离心、分离，得上清液；(3)配制一系列浓度梯度的维生素C水溶液作为标准物质，进行在线HPLC‑FRSD分析，建立负峰面积Y和相对应VC浓度X的线性方程；(4)将步骤(2)中所得上清液经0.22微米有机滤膜过滤后进行上样分析，将HPLC‑FRSD系统测得的样品负峰面积带入步骤(3)的线性方程，换算成维生素C当量，以求得各样品甲醇提取物的抗氧化值；所述高效液相色谱分析仪使用的流动相为0.1％醋酸水溶液与甲醇的混合液，所述0.1％醋酸水溶液与甲醇的体积比为37：63；所述流动相的流速为0.91mL﹒min‑1；所述柱温箱设置的柱温为30℃，所述PAD检测器PAD检测波长：2D通道分别设置283nm和245nm。