[发明专利]响应面法优化超声-微波协同提取的山茱萸总皂苷及方法

摘要

本发明响应面法优化超声‑微波协同提取山茱萸总皂苷的方法，包括以下步骤(1)材料处理，得到山茱萸药材粉末；(2)超声‑微波协同提取，得到总皂苷样液；(3)大孔树脂纯化，洗脱液浓缩干燥后得到粉末状的山茱萸总皂苷。本发明山茱萸总皂苷，由以上所述的提取方法制得。本发明通过结合超声波的空化作用和微波的高能红外加热作用，实现对样品进行快速、高效、可靠地处理，在缩短提取时间，提高提取效率，保证提取物结构的同时，通过分别对料液比、微波功率、超声功率和提取时间的进行限定，山茱萸总皂苷的提取率达到13.96mg/g，提取率提高达20％，原料利用率高，高效省时，大大节约了成本，适应于工业生产。

主权项

响应面法优化超声‑微波协同提取山茱萸总皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)材料处理：将新鲜成熟的山茱萸果实在开水中浸泡数分钟后，流水冲洗冷却，剥除果核；将剩余的果肉干燥后粉碎，过40目筛，得到山茱萸药材粉末；(2)超声‑微波协同提取：称取一定量的山茱萸药材粉末，置于反应容器中，按料液比为1:21的比例混匀加入体积分数为70％的乙醇溶液并密封，连接好冷凝装置，在温度70℃，微波功率417W，超声功率369W的条件下提取5min得到提取液；提取液挥去乙醇后通过水饱和正丁醇萃取，合并萃取液后减压挥去正丁醇，经蒸馏水复溶得到总皂苷样液；(3)大孔树脂纯化：将总皂苷样液过HPD‑300型大孔树脂，洗脱液浓缩干燥后得到粉末状的山茱萸总皂苷；所述的料液比1:21，微波功率为417W，超声功率为369W和时间5min的提取条件由响应面法优化得到，步骤如下；1)制备山茱萸总皂苷样品液；称取山茱萸药材粉末1g，置于反应瓶中，加入70％的乙醇溶液密封，连接好回流装置，在一定条件下提取，抽滤，挥去乙醇，水饱和正丁醇萃取，定容至20mL，得到山茱萸总皂苷样品液备用；精密称取齐墩果酸标品2.0mg，用无水乙醇制得0.2mg/mL的标准品溶液，并绘制标准曲线；按照标准曲线下的检测方法进行测定，并根据标准曲线的线性回归方程计算山茱萸总皂苷样品液中总皂苷的含量；2)单因素实验；根据步骤1)中山茱萸总皂苷样品液的制备方法，分别按料液比、超声功率、微波功率和提取时间四个单因素设计若干组单因素实验；3)响应面法优化；以山茱萸总皂苷提取率为响应因子，采用Design‑Expert软件中的Box‑Behnken原理在步骤2)中单因素实验的基础上进行响应面实验，模拟得到二次多元回归方程如下：R1＝13.76+0.34A+0.25B+0.16C－1.22D+0.25AB+0.34AC－0.01AD+0.42BC+0.068BD+0.21CD－0.75A2－1.02B2－0.85C2－1.49D2其中，R1为相应因子，A为料液比的影响量，B为微波功率的影响量，C为超声功率的影响量，D为时间的影响量；4)通过Design‑Expert软件对回归方程的求解，得到山茱萸总皂苷提取的最佳条件为：料液比1:21.47、微波功率417.37W、超声功率368.78W、时间4.81min；再以实际操作为约束条件，将修正得到最佳提取工艺参数为：料液比1:21、微波功率417W、超声功率369W、时间5min。