[发明专利]一种提高楸树增殖系数的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种提高楸树增殖系数的组织培养方法，其内容包括无菌培养物的建立、腋芽的诱导、腋芽的增殖、芽苗生根培养以及组培苗的栽培5个技术环节。利用本方法进行楸树组织培养快速育苗具有芽诱导率高、增殖系数大、生根率高和移栽成活率高的优点，尤其在本发明中选择出楸树增殖最优培养基配方MS+BA1.5mg/L+ZT0.1mg/L+IAA0.2mg/L，以及继代时连同茎段基部愈伤一起继代的继代方法，使楸树增值系数为11.0-23.2，平均增殖系数达15.3。该方法可以为林业生产中楸树的大规模栽培提供一种繁殖速度快、生产周期短、稳定性好的育苗方法。

主权项

一种提高楸树增殖系数的组织培养方法，其包括如下步骤：(1)无菌培养物的建立选取当年生楸树新发嫩梢，剪去叶片和叶柄，切割成3～5cm长带有腋芽的茎段，将带芽茎段用洗衣粉上清液浸泡30min，用软刷刷洗节段后再置流水下冲洗30min；在超净工作台上，用75％乙醇浸泡30s，无菌水冲洗2次，然后用0.1％的氯化汞处理8min，用无菌水冲洗6次，获得无菌外植体。(2)腋芽的诱导将获得的无菌带芽茎段接种到诱导培养基上促进腋芽的萌发和生长，诱导培养基为MS基本培养基，加入0.05～0.3mg/L的IBA，0.2～1.0mg/L的BA，以及30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂，调节培养基pH为6.0。(3)腋芽的增殖待外植体腋芽诱导30d后，把上述诱导的腋芽转移到增殖培养基进行扩繁增殖，增殖培养基为MS基本培养基，加入1.5～6mg/L的BA，0.1～0.3mg/L的ZT，0.2mg/L的IAA，以及30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂，以及30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂，调节培养基pH为6.0；每20d在原培养基上继代一次，继代时，将茎段基部愈伤一起继代。(4)芽苗生根培养选取步骤(3)中增殖的2～3cm长的芽苗转移到生根培养基中，生根培养基为1/2MS基本培养基，附加0.01～0.05mg/L的NAA，以及30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂，调节培养基pH为6.0。(5)炼苗与移栽移栽前，把增殖获得的生根苗在培养架上拧开盖子放置7d炼苗，炼苗后取出生根组培苗，洗净根上滞留的琼脂培养基后移入营养土(泥炭土∶珍珠岩＝1∶1)中培养，喷雾每天8:00～19:00隔30min喷水15s，控制环境湿度为80～90％，等小苗有新叶长出后，逐渐降低环境湿度，按常规苗圃育苗措施管理。