[发明专利]海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法有效
| 申请号： | 201410330373.5 | 申请日： | 2014-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN104099362B | 公开（公告）日： | 2017-01-25 |
| 发明（设计）人： | 孟尔;张东裔;张辉;鲍邵衡;李文颖;吴磊;朱凌云;柳珑 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军国防科学技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P21/02 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司43113 | 代理人： | 卢宏 |
| 地址： | 410073 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供一种快速、高纯度的制备具有生物活性的重组海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法。rHNIV‑01与天然海南毒素‑IV(HNTX‑IV)相比，氨基酸序列组成几乎全部一样，仅在C末端没有进行酰胺化修饰。该方法并不使用常规的亲和层析纯化融合蛋白，而是直接在破菌产物中加入蛋白激酶进行切割，接着用三氯乙酸(TCA)抽提法直接将切割产物rHNIV‑01进行选择性的活性抽提，最后使用RP‑HPLC进行纯化。使用该方法能够稳定获得3mg/L的高纯度rHNIV‑01。纯化的rHNIV‑01能够选择性的抑制大鼠DRG细胞上的TTX‑S敏感型钠电流。 | ||
| 搜索关键词： | 海南 毒素 iv 类似物 rhniv 01 表达 载体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体，其特征在于，所述表达载体序列如SEQ ID NO.4所示。
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