[发明专利]一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法有效
| 申请号： | 201410339765.8 | 申请日： | 2014-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN105319316B | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 张大伟;刘永飞;李斐然;姜文侠;张笑然;郑平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | G01N31/10 | 分类号： | G01N31/10 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 马莉华;崔佳佳 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法，将样品溶液稀释后与含有NADH、PLP、乙醇脱氢酶和DTT的溶液混匀反应后，再与含有LTA的溶液反应，通过检测计算OD340降低速率，与标准曲线进行比较获得苏氨酸的含量。本发明的方法，可简单、快速且准确地检测发酵液中苏氨酸的含量，检测通量高、费用低、时间短、误差小。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 发酵 中苏 氨酸 含量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测样品中苏氨酸含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(i)将样品与第一反应溶液混合均匀，得到第一混合溶液；(ii)将所述第一混合溶液置于4±1℃放置10‑90min后恢复温度至15‑30℃；(iii)将第一混合溶液与第二反应溶液混合均匀得到第二混合溶液；(iv)检测所述第二混合溶液的OD340，每隔1‑5分钟检测一次，共检测5‑7次；(v)以检测时间和对应的OD340作图，计算斜率即为样品的OD340降低速率；(vi)将计算得到的OD340的降低速率与标准曲线进行比较，得到所述样品中苏氨酸含量，其中，所述第一反应溶液含有HEPES buffer、NADH、PLP、乙醇脱氢酶、DTT和水；所述第一混合溶液中含有10‑500mM HEPES buffer、100μM‑1000μM NADH、10μM‑100μM PLP、1U‑50U乙醇脱氢酶和0.5mM‑8mM DTT；所述第二反应溶液中含有1‑20U LTA，余量为水。
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