[发明专利]一种甘草次酸的制备方法

摘要

本发明公开了一种甘草次酸的制备方法，包括（1）将β‑葡萄糖苷酶液固定在多孔陶瓷球中得到多孔陶瓷球固定化酶，最后用丙烯酸树脂油性胶黏剂溶液对干燥后的多孔陶瓷球固定化酶进行包封；（2）将甘草用pH 8～9的氨水渗漉提取制备甘草提取液；（3）将步固定化β‑葡萄糖苷酶的多孔陶瓷球，装入柱床，然后将甘草提取液流入柱床进行酶反应，然后经沉淀、过滤、结晶得到甘草次酸。本发明所述的制备方法相比酸水解催化法，反应条件温和，不污染环境，且多孔陶瓷球固定化酶与游离的细胞或者酶催化法制备甘草次酸相比，酶催化体系更稳定，一次投入可以反复使用，生产效率大大提高，非常适合工业化大规模生产。

主权项

一种甘草次酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）β‑葡萄糖苷酶的固定化：向多孔陶瓷球中加入β‑葡萄糖苷酶液，所述的多孔陶瓷球和β‑葡萄糖苷酶液的质量比为100：0.3～1.5，所述的β‑葡萄糖苷酶液中β‑葡萄糖苷酶的质量百分含量为0.2～0.9%，然后加入戊二醛至终浓度为0.3 ～ 0.8%，在120r/min的转速下室温震荡交联2～6h后，在45~55℃温度条件下干燥8~10h得到多孔陶瓷球固定化酶，最后用丙烯酸树脂油性胶黏剂对干燥后的多孔陶瓷球固定化酶进行包封；（2）制备甘草提取液：将甘草用pH= 8～9的氨水渗漉提取，且漉的流速为5～8ml/min.kg，所述的甘草的质量和氨水的体积比为1g：（8～12）ml，然后用浓度为0.2~0.8mol/L的磷酸调节溶液的pH至6.0，得到含有甘草酸的甘草提取液；（3）制备甘草次酸：将步骤（1）制备得到的固定化β‑葡萄糖苷酶的多孔陶瓷球，装入柱床，首先用浓度为50mmol/L的柠檬酸‑磷酸氢二钠缓冲液淋洗，并控制柱床温度32～45℃，然后将甘草提取液流入柱床进行酶反应，流速为0.5~1.5BV/h，流出液重复上样循环3～4次，酶反应完毕，将反应液调节pH至2.0，甘草次酸沉淀完全后过滤，最后用二氯甲烷结晶2次，得到甘草次酸。