[发明专利]4H-[1]-苯并吡喃[4,3-b]噻吩-2-甲酸酰肼及其衍生物在糖蛋白特异性荧光预染检测法中的应用

摘要

本发明涉及糖蛋白特异性荧光预染检测法检测技术，具体地说是4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼及其衍生物在糖蛋白特异性荧光预染检测法中的应用。本发明还提供了应用4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼进行糖蛋白特异性荧光预染检测的方法，包括步骤：向蛋白质样品中加入高碘酸溶液进行氧化；加入抗坏血酸溶液中和过量高碘酸溶液；加入染料反应；加入上样缓冲液；电泳；观察。本预染发明具有灵敏度高、选择性好、操作简单迅速、重现性好、线性关系好、质谱兼容性好、使用安全、成本低廉等优点。此外相对于凝胶电泳后糖蛋白染色方法，预染检测法在电泳结束后即可观察，节省了凝胶电泳后染色步骤，可较好地适用于高通量蛋白质组学的研究。

主权项

1.4H-[1]-苯并吡喃[4，3-b]噻吩-2-甲酸酰肼在一种灵敏度接近Pro-Q Emerald488染色法并且不影响蛋白质结构的凝胶上糖蛋白特异性荧光预染检测法中的应用，其包括步骤：1)在10μL含0.5-10μg蛋白样品中加入0.03M高碘酸水溶液10μL，置于避光处进行氧化反应10min；2)在反应液中加入0.24M抗坏血酸5μL，摇匀反应1min；3)在反应液中加入重量体积含量为2％的4H-[1]-苯并吡喃[4，3-b]噻吩-2-甲酸酰肼的二甲基亚砜溶液2.5μL，37℃环境下反应30min；4)在反应液中加入30μL 3X蛋白质上样缓冲液，摇匀；5)电泳，观察。