[发明专利]一种微球荧光强度标准物质的定值方法

摘要

本发明公开了一种微球荧光强度标准物质的定值方法，其包括如下步骤：(1)制备微球荧光强度标准物质；(2)测定荧光素粉末纯度，以备计算配制荧光素标准母液；(3)校准荧光分光光度计，建立仪器荧光响应值与荧光素浓度的校准曲线；(4)测定微球荧光强度标准物质的颗粒数量浓度；(5)测量样品荧光响应值，计算样品中的荧光素浓度和每个微球荧光强度标准物质颗粒所携带的荧光分子数MESF。本发明定值方法具有良好的准确性、可靠性和量值溯源性。

主权项

一种微球荧光强度标准物质的定值方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备微球荧光强度标准物质；(2)测定荧光素粉末纯度，以备计算配制荧光素标准母液；(3)校准荧光分光光度计，配制荧光素标准母液，建立仪器荧光响应值与荧光素浓度的校准曲线；(4)测定微球荧光强度标准物质的颗粒数量浓度：用PBS溶液将微球荧光强度标准物质稀释得到悬浊液，用移液器吸取所述悬浊液置于网格滤膜上，并进行抽滤，将所述悬浊液中的颗粒物全部截留于所述网格滤膜上，然后对所述网格滤膜上的颗粒物进行计数，利用公式Ⅰ计算得到标准物质的颗粒数量浓度C_N：$C_N=\frac{N}{V}\×f$     公式ⅠC_N：微球荧光强度标准物质的颗粒数量浓度，ml^‑1；N：颗粒数量计数值；V：移液器吸取悬浊液的体积，ml；f：稀释倍数；(5)测量样品荧光响应值，根据荧光响应值与荧光素浓度的校准曲线得到样品中的荧光素浓度，再根据标准物质的颗粒数量浓度C_N计算得到每个微球荧光强度标准物质颗粒所携带的荧光分子数MESF。